MassChrom® Aminosäuren und Acylcarnitine aus Trockenblut - LC-MS/MS

Bestell-Nr.: 55000/F, für 960 Tests
Parameter:
Acylcarnitine & freies Carnitin, Aminosäuren

Probenvorbereitung mit Derivatisierung der Analyten
Mit 96-Well-Filter-Platten

Aminosäuren
Acylcarnitine und freies Carnitin
Alanin Freies Carnitin
Arginin C2-Carnitin
Asparginsäure C3-Carnitin
Citrullin C4-Carnitin
Glutaminsäure C5-Carnitin
Glycin C5DC-Carnitin
Leucin C6-Carnitin
Methionin C8-Carnitin
Ornithin C10-Carnitin
Phenylalanin C12-Carnitin
Prolin C14-Carnitin
Tyrosin C16-Carnitin
Valin C18-Carnitin

Klinische Relevanz

Ziel des Neugeborenen-Screenings (NBS) ist das frühzeitige Erkennen angeborener Stoffwechselstörungen, bevor diese zu Schäden am Organismus führen. Darunter fallen Störungen des Aminosäurestoffwechsels wie der Phenylketonurie (PKU) und der Ahornsirup-Krankheit (MSUD), Störungen des Fettsäurestoffwechsels sowie Organoazidurien (Isovalerianazidämie). Werden diese Krankheiten nicht diagnostiziert, so können diese Stoffwechselstörungen bereits in den ersten Lebenstagen zu schweren irreversiblen Schäden bei Neugeborenen führen.

Die Massenspektrometrie ist dabei die Methode der Wahl: sie erlaubt die Erfassung eines breiten Spektrums an Stoffwechseldefekten in einem einzigen Lauf. Durch die hohe Selektivität der LC-MS/MS kann auch auf eine HPLC-Säule verzichtet werden. Damit ist eine sehr präzise Quantifizierung in einer sehr kurzen Analysenzeit von unter 2 Minuten möglich.

 

Produktvorteile

  • Screening von vielen Stoffwechselstörungen in einem einzigen Lauf, z.B. Phenylketonurie (PKU) und Ahornsirupkrankheit (MSUD)
  • Je ein eigener interner Standard pro Analyt 

 

Dieser Chromsystems Kit erlaubt eine schnelle und zuverlässige Bestimmung von Aminosäuren, Acylcarnitinen und Succinylaceton aus Trockenblut im Rahmen des Neugeborenen-Screenings von Aminosäure- und Fettsäurestoffwechselstörungen mittels Tandem-Massenspektrometrie. Die Probenvorbereitung basiert auf einer effektiven Extraktion der Analyten aus dem Blood Spot mit anschließender Derivatisierung. Um eine sichere und präzise Quantifizierung der Analyten zu gewährleisten, verwendet die Methode stabile isotopenmarkierte interne Standards für die Kalibrierung und Messung.

Hier geht‘s zur Übersicht aller unserer Assays zum Neugeborenen-Screening.

Weitere Informationen
Anzahl der Bestimmungen 960
Bestimmungsgrenzen

Aminosäuren: 0,5-5 μmol/l
(Acyl-)Carnitine: 0,05-0,5 μmol/

Linearität

Aminosäuren: 250-2500 μmol/l
(Acyl-)Carnitine: 11-240 μmol/l

Wiederfindungsrate Amino acids: 51-94 %; (Acyl-)carnitines: 62-89 %
Intraassay

Aminosäuren: VK = 4-10 %
(Acyl-)Carnitine: VK = 4-20 %

Interassay

Aminosäuren: VK = 5-9 %
(Acyl-)Carnitine: VK = 8-28 %

Analysendauer < 2 min
Cutoff-Werte
Aminosäuren 22-743 µmol/l
freies Carnitin 50-60 µmol/l
Acylcarnitine 0,1-48 µmol/l
Probenvorbereitung
  • 3,2 mm Blood Spot aus den Filterkarten in eine 96-Well-Platte ausstanzen.
  • 200 μl Internal Standard hinzufügen und 20 min schwenken.
  • Überstand in eine neue 96-Well-Platte überführen (oder bei 55000/F 2 min zentrifugieren).
  • Überstand eindampfen.
  • 60 μl Derivatisation Reagent zugeben und 15 min bei 60 °C inkubieren.
  • Überstand eindampfen.
  • 100 μl Reconstitution Buffer zugeben und 1 min schwenken.
  • 10 μl in das LC-MS/MS-System injizieren.

 

In der Probenvorbereitung zur Analytik von Succinylaceton müssen folgende zusätzlichen Schritte vor der Derivatisierung durchgeführt werden: Internal Standard zugeben, 30 min schütteln, Extrakte vereinigen (pipettieren), 20 min inkubieren.

Für mehr Details siehe Arbeitsvorschrift.

Probenmaterial Trockenblut
Präanalytik

Probenentnahme: Blut aus der Ferse des Neugeborenen direkt auf eine Filterkarte geben. Entnahme zwischen 24. und 72. Lebensstunde, abhängig von der nationalen Richtlinie.

Probenstabilität: Lagerung bei niedriger Feuchtigkeit (< 30 %) und Raumtemperatur ausreichend, wenn die Analyse innerhalb von 24 bis 48 Stunden durchgeführt wird. Für eine längere Lagerung die Proben unter Feuchtigkeitsschutz tiefgefroren unter -18 °C aufbewahren.

Injektionsvolumen 10 µl
Flussrate 20–600 µl/min
MS/MS-Modus Aminosäuren: MRM / Neutral Loss Scan von 102 (m/z); Acylcarnitine: Parent Ion Scan von 85 (m/z)
Zusätzliche Informationen

Es ist keine HPLC-Säule erforderlich.

Information

Massenübergänge der Analyte und internen Standards

Aminosäuren Neutral Loss Scan 102
Alanin 146 > 44
Alanin-D4 150 > 48
Asparaginsäure 246 > 144
Asparaginsäure-D3 249 > 147
Glutaminsäure 260 > 158
Glutaminsäure-D5 265 > 163
Leucin 188 > 86
Leucin-D3 191 > 89
Methionin 206 > 104
Methionin-D3 209 > 107
Phenylalanin 222 > 120
Phenylalanin-D5 227 > 125
Tyrosin 238 > 136
Tyrosin-D4 242 > 140
Valin 174 > 72
Valin-D8 182 > 80
Aminosäuren MRM
Arginin 231 > 70
Arginin-D7 238 > 77
Citrullin 232 > 113
Citrullin-D2 234 > 115
Glycin 132 > 76
Glycin-13C2-15N 135 > 79
Ornithin 189 > 70
Ornithin-D6 195 > 76
Prolin 172 > 116
Prolin-D7 179 > 123
Acylcarnitine und freies Carnitin Parent Ion Scan 85
Carnitin 218 > 85
Carnitin-D9 227 > 85
C2-Carnitin 260 > 85
C2-Carnitin-D3 263 > 85
C3-Carnitin 274 > 85
C3-Carnitin-D3 277 > 85
C4-Carnitin 288 > 85
C4-Carnitin-D3 291 > 85
C5-Carnitin 302 > 85
C5-Carnitin-D9 311 > 85
C5DC-Carnitin 388 > 85
C5DC-Carnitin-D6 394 > 85
C6-Carnitin 316 > 85
C6-Carnitin-D3 319 > 85
C8-Carnitin 344 > 85
C8-Carnitin-D3 347 > 85
C10-Carnitin 372 > 85
C10-Carnitin-D3 375 > 85
C12-Carnitin 400 > 85
C12-Carnitin-D3 403 > 85
C14-Carnitin 428 > 85
C14-Carnitin-D3 431 > 85
C16-Carnitin 456 > 85
C16-Carnitin-D3 459 > 85
C18-Carnitin 484 > 85
C18-Carnitin-D3 487 > 85
Hinweis Bitte beachten Sie, dass die frei zugänglichen Informationen dieser Website, insbesondere auch der Probenvorbereitung, nicht zur Verwendung der Produkte ausreichen. Bitte lesen Sie dazu die Anweisungen und Warnhinweise auf Produkten und/oder in der Arbeitsvorschrift.
Method of Analysis LC-MS/MS
Parameter Acylcarnitine & freies Carnitin, Aminosäuren
Autosampler-Spüllösung Rinsing Solution (55007)
  1. 55001 newborn screening mobile phase
    Mobile Phase
    Bestell-Nr.: 55001

    MassChrom® Aminosäuren und Acylcarnitine aus Trockenblut - LC-MS/MS

    Details
  2. 55002 newborn screening mobile phases
    Mobile Phase, 10 x 1000 ml
    Bestell-Nr.: 55002

    MassChrom® Aminosäuren und Acylcarnitine aus Trockenblut - LC-MS/MS

    Details
  3. 55004 newborn screening internal standard
    Internal Standard
    Bestell-Nr.: 55004

    MassChrom® Aminosäuren und Acylcarnitine aus Trockenblut - LC-MS/MS

    Details
  4. 55005 newborn screening derivatisation reagent
    Derivatisation Reagent
    Bestell-Nr.: 55005

    MassChrom® Aminosäuren und Acylcarnitine aus Trockenblut - LC-MS/MS

    Details
  5. Reconstitution Buffer
    Reconstitution Buffer
    Bestell-Nr.: 55006

    MassChrom® Aminosäuren und Acylcarnitine aus Trockenblut - LC-MS/MS

    Details
  6. 55007 LCMS amino acid acylcarnitines rinsing solution
    Rinsing Solution
    Bestell-Nr.: 55007

    MassChrom® Aminosäuren und Acylcarnitine aus Trockenblut - LC-MS/MS

    Details
  7. 55008 newborn screening extraction buffer
    Extraction Buffer
    Bestell-Nr.: 55008

    MassChrom® Aminosäuren und Acylcarnitine aus Trockenblut - LC-MS/MS

    Details
  8. 96-Well-Platten
    96-Well-Platten
    Bestell-Nr.: 55010/F

    MassChrom® Aminosäuren und Acylcarnitine aus Trockenblut - LC-MS/MS

    Details
  9. 96-Well-Filterplatten
    96-Well-Filterplatten
    Bestell-Nr.: 55057

    MassChrom® Aminosäuren und Acylcarnitine aus Trockenblut - LC-MS/MS

    Details
  10. Abdeckfolien für 96-Well-Platten
    Abdeckfolien für 96-Well-Platten
    Bestell-Nr.: 55011

    MassChrom® Aminosäuren und Acylcarnitine aus Trockenblut - LC-MS/MS

    Details
  11. 0191 0192 0193 newborn screening controls
    MassCheck® Amino Acids, Acylcarnitines, Succinylacetone Dried Blood Spot Controls
    Bestell-Nr.: 0191/0192/0193

    MassChrom® Aminosäuren und Acylcarnitine aus Trockenblut - LC-MS/MS
    MassChrom® Aminosäuren und Acylcarnitine aus Trockenblut/Non Derivatised - LC-MS/MS

    Details
  1. 0191 0192 0193 newborn screening controls
    MassCheck® Amino Acids, Acylcarnitines, Succinylacetone Dried Blood Spot Controls
    Bestell-Nr.: 0191/0192/0193

    MassChrom® Aminosäuren und Acylcarnitine aus Trockenblut - LC-MS/MS
    MassChrom® Aminosäuren und Acylcarnitine aus Trockenblut/Non Derivatised - LC-MS/MS

    Details
  1. PEEK-Vorfiltergehäuse
    PEEK-Vorfiltergehäuse
    Bestell-Nr.: 15010
    Details
  2. 55099 LCMS tuning mix amino acids acylcarnitines
    Tuning Mix Aminosäuren und Acylcarnitine
    Bestell-Nr.: 55099

    MassChrom® Aminosäuren und Acylcarnitine aus Trockenblut - LC-MS/MS

    Details
  3. Abdeckfolien, geschlitzt, für 96-Well-Platten
    Abdeckfolien, geschlitzt, für 96-Well-Platten
    Bestell-Nr.: 55013

    MassChrom® Aminosäuren und Acylcarnitine aus Trockenblut - LC-MS/MS

    Details
  4. Restrictor Capillary
    Restrictor Capillary
    Bestell-Nr.: 55015
    MassChrom® Aminosäuren und Acylcarnitine aus Trockenblut - LC-MS/MS
    Details
  5. Adapter Collar zur Zentrifugation
    Adapter Collar zur Zentrifugation
    Bestell-Nr.: 55016

    MassChrom® Aminosäuren und Acylcarnitine aus Trockenblut - LC-MS/MS

    Details
  6. PEEK-Vorfilterblättchen, 2 µm
    PEEK-Vorfilterblättchen, 2 µm
    Bestell-Nr.: 55033
     
    Details
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