Vitamin B1 und B6 im Vollblut, mit 96-Well-Filterplatten – HPLC Reagent Kit

Bestell-Nr.: 52752/F, für 960 Tests
Parameter:
Vitamin B1 (TPP, Thiaminpyrophosphat), Vitamin B6 (PLP, Pyridoxal-5’-phosphat)

Spezifischer interner Standard für jeden Parameter
Keine Nachsäulen-Derivatisierung
Eine Probenvorbereitung und ein Lauf für beide Parameter

Assay validiert nach IVDR (=> Konformitätserklärung)

Vitamin B1 (TPP, Thiaminpyrophosphat)

Vitamin B6 (PLP, Pyridoxal-5’-phosphat)

Klinische Relevanz
Vitamin B1 (Thiamin) spielt eine wichtige Rolle bei der Energiegewinnung aus Kohlenhydraten und Fetten. Die aktive Form ist das Thiaminpyrophosphat (TPP), ein Coenzym für einige enzymatische Reaktionen des Kohlenhydratstoffwechsels sowie für die Pyruvat-Decarboxylase. TPP ist außerdem beim oxidativen Glucoseabbau maßgeblich beteiligt. Die Bestimmung der Konzentration von TPP ist aussagekräftiger als Messungen des Gesamtthiamins, da so ausschließlich die physiologisch wirksame Form berücksichtigt wird.

Vitamin B6 umfasst Pyridoxin, Pyridoxamin und Pyridoxal sowie deren Phosphatderivate. Es wird über die Nahrung aufgenommen und über mehrere enzymatische Umwandlungen in die aktive Form Pyridoxal-5‘-Phosphat (PLP) überführt. PLP ist an nahezu hundert enzymatischen Reaktionen beteiligt, unter anderem als Cofaktor beim Aminosäurestoffwechsel sowie bei der Bildung des roten Blutfarbstoffs und von Neurotransmittern im Gehirn.

 

Produktvorteile
• Spezifischer interner Standard für jeden Parameter
• Keine Nachsäulen-Derivatisierung
• Eine Probenvorbereitung und ein Lauf für beide Parameter

 

Assay-Charakteristika
Dieser HPLC-Assay ermöglicht die kombinierte Analytik von Vitamin B1 im Vollblut und B6 im Vollblut oder Plasma. Die Probenvorbereitung wird automatisiert in 96 Well-Filterplatten durchgeführt für maximalen Output und minimalen Arbeitsaufwand. Der interne Standard für jeden der beiden Parameter sowie spezielle Qualitätskontrollen gewährleisten eine präzise und sichere Quantifizierung.

Chromsystems bietet zwei weitere Assays zur manuellen Bestimmung mittels HPLC an: eine Standardvariante sowie eine Methode zur vereinfachten Probenvorbereitung mit Pre-Mixed Tubes.

Alternativ gibt es auch eine automatisierte Methode mittels UHPLC.

 

Zwei Kit-Typen verfügbar

Basic Kit
• Nur Probenvorbereitungsreagenzien und Vials enthalten
• Keine überschüssigen Mengen an mobiler Phase und Kalibrator

52052-F-BK Basic Kit
Für 960 Probenvorbereitungen

52744 Internal Standard Mix, 50 ml (1x)
52705 Extraction Reagent, 75 ml (2x)
52706 Prep Solution, 25 ml (3x)
52707 Finisher 1, 5 x 0.25 ml (lyoph.) (2x)
52708 Finisher 2, 50 ml (1x)
52709 Dilution Buffer, 100 ml (1x)
52057 96 Well Filter Plates, 5 pcs. (2x)
52058 Collection Plates, 10 pcs. (2x)
52059 Pierceable Adhesive Seals, 5 pcs. (2x)

Reagent Kit
• Mobile Phase und Kalibrator enthalten
 

52752/F Reagent Kit
Für 960 Tests

52744 Internal Standard Mix, 50 ml (1x)
52705 Extraction Reagent, 75 ml (2x)
52706 Prep Solution, 25 ml (3x)
52707 Finisher 1, 5 x 0.25 ml (lyoph.) (2x)
52708 Finisher 2, 50 ml (1x)
52709 Dilution Buffer, 100 ml (1x)
52057 96 Well Filter Plates, 5 pcs. (2x)
52058 Collection Plates, 10 pcs. (2x)
52059 Pierceable Adhesive Seals, 5 pcs. (2x)
52100 HPLC Column, 1 pc. (1x)
52001 Mobile Phase A, 1000 ml (10x)
52022 Mobile Phase B, 1000 ml (10x)
52003 Whole Blood Calibration Standard, 5 x 1.0 ml (lyoph.) (5x)
Weitere Informationen
Analysenmethode HPLC
Anzahl der Tests 960
Hinweis Die hier aufgeführten Informationen einschließlich der Probenvorbereitung sind für die Verwendung des Produkts nicht ausreichend. Bitte lesen Sie die Angaben in der Arbeitsvorschrift. Dort befinden sich detaillierte Informationen zu Limitationen, die mit der Verwendung des Produkts gemäß seiner Zweckbestimmung verbunden sind. Detaillierte Daten zur Leistungsbewertung finden Sie im Anhang der Arbeitsvorschrift.
Untere und obere Bestimmungsgrenze

TPP 4,2 – 750 µg/l (Vollblut)
PLP 1,1 – 500 µg/l (Vollblut)

Probenmaterial Vollblut
Probenvorbereitung

Die hier aufgeführten Informationen zur Probenvorbereitung sind für die Verwendung im Labor nicht ausreichend. Eine detaillierte Schritt-für-Schritt-Beschreibung finden Sie in der Arbeitsvorschrift.

  • 100 μl Vollblut/Kalibrator/Kontrolle und 50 μl Internal Standard Mix in eine 96-Well-Collection Plate geben.
  • 150 μl Extraction Reagent zugeben und 4 min schütteln.
  • Niederschlag durch Zentrifugation abtrennen (3 min, 2000 x g).
  • 75 μl Überstand in eine 96 Well Filterplatte überführen.
  • 75 μl Prep Solution und 50 μl der Finisher-Lösung zugeben.
  • 30 s mischen.
  • Niederschlag durch Zentrifugation abtrennen (2,5 min, 1500 x g).
  • Den Überstand 45 min bei 60 °C inkubieren.
  • 100 μl Dilution Solution hinzufügen und kurz mischen (30 s).
  • Verschließen der Platte und Transfer zum Autosampler.
Laufzeit 9 min
Injektionsvolumen 25 µl
Flussrate 1,5–2,3 ml/min
Säulentemperatur +20 bis +25 °C
Messwellenlängen

Start mit EX 320 nm, EM 415 nm
Nach ca. 3,8 min auf EX 367 nm, EM 435 nm umschalten

Zus. Informationen Es eignet sich jedes gängige HPLC-System mit binärer Pumpe und programmierbarem Fluoreszenz-Detektor.
Parameter Vitamin B1 (TPP, Thiaminpyrophosphat), Vitamin B6 (PLP, Pyridoxal-5’-phosphat)

Vitamin B1 and Vitamin B6 in Whole Blood – HPLC Reagent Kit (52752/F)
For 960 tests

Order No. Reagent Kit components (Quantities in kit)
52001 Mobile Phase A, 1000 ml (10x)
52022 Mobile Phase B, 1000 ml (10x)
52003 Whole Blood Calibration Standard, 5 x 1.0 ml (lyoph.) (5x)
52744 Internal Standard Mix, 50 ml (1x)
52705 Extraction Reagent, 75 ml (2x)
52706 Prep Solution, 25 ml (3x)
52707 Finisher 1, 5 x 0.25 ml (lyoph.) (2x)
52708 Finisher 2, 50 ml (1x)
52709 Dilution Buffer, 100 ml (1x)
52057 96 Well Filter Plates, 5 pcs. (2x)
52058 Collection Plates, 10 pcs. (2x)
52059 Pierceable Adhesive Seals, 5 pcs. (2x)
52100 HPLC Column, 1 pc. (1x)

 

Order No. Required components (not included in the Reagent Kit)
0165 Vitamin B1/B6 Whole Blood Control, Level I, 5 x 2.0 ml (lyoph.)
0167 Vitamin B1/B6 Whole Blood Control, Level II, 5 x 2.0 ml (lyoph.)

 

Order No. Lab equipment
15010 PEEK Prefilter Housing, 1 pc.
15011 PEEK-encased Prefilter, 2 µm, 5 pcs.
18001 Precolumn Cartridge Holder 4/10, 1 pc.
18010 Precolumn Cartridge 4/10, 1 pc.
Die folgenden Komponenten sind im Kit enthalten:
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Vitamin B1 (TPP, Thiaminpyrophosphat)

Vitamin B6 (PLP, Pyridoxal-5’-phosphat)

Klinische Relevanz
Vitamin B1 (Thiamin) spielt eine wichtige Rolle bei der Energiegewinnung aus Kohlenhydraten und Fetten. Die aktive Form ist das Thiaminpyrophosphat (TPP), ein Coenzym für einige enzymatische Reaktionen des Kohlenhydratstoffwechsels sowie für die Pyruvat-Decarboxylase. TPP ist außerdem beim oxidativen Glucoseabbau maßgeblich beteiligt. Die Bestimmung der Konzentration von TPP ist aussagekräftiger als Messungen des Gesamtthiamins, da so ausschließlich die physiologisch wirksame Form berücksichtigt wird.

Vitamin B6 umfasst Pyridoxin, Pyridoxamin und Pyridoxal sowie deren Phosphatderivate. Es wird über die Nahrung aufgenommen und über mehrere enzymatische Umwandlungen in die aktive Form Pyridoxal-5‘-Phosphat (PLP) überführt. PLP ist an nahezu hundert enzymatischen Reaktionen beteiligt, unter anderem als Cofaktor beim Aminosäurestoffwechsel sowie bei der Bildung des roten Blutfarbstoffs und von Neurotransmittern im Gehirn.

 

Produktvorteile
• Spezifischer interner Standard für jeden Parameter
• Keine Nachsäulen-Derivatisierung
• Eine Probenvorbereitung und ein Lauf für beide Parameter

 

Assay-Charakteristika
Dieser HPLC-Assay ermöglicht die kombinierte Analytik von Vitamin B1 im Vollblut und B6 im Vollblut oder Plasma. Die Probenvorbereitung wird automatisiert in 96 Well-Filterplatten durchgeführt für maximalen Output und minimalen Arbeitsaufwand. Der interne Standard für jeden der beiden Parameter sowie spezielle Qualitätskontrollen gewährleisten eine präzise und sichere Quantifizierung.

Chromsystems bietet zwei weitere Assays zur manuellen Bestimmung mittels HPLC an: eine Standardvariante sowie eine Methode zur vereinfachten Probenvorbereitung mit Pre-Mixed Tubes.

Alternativ gibt es auch eine automatisierte Methode mittels UHPLC.

 

Zwei Kit-Typen verfügbar

Basic Kit
• Nur Probenvorbereitungsreagenzien und Vials enthalten
• Keine überschüssigen Mengen an mobiler Phase und Kalibrator

52052-F-BK Basic Kit
Für 960 Probenvorbereitungen

52744 Internal Standard Mix, 50 ml (1x)
52705 Extraction Reagent, 75 ml (2x)
52706 Prep Solution, 25 ml (3x)
52707 Finisher 1, 5 x 0.25 ml (lyoph.) (2x)
52708 Finisher 2, 50 ml (1x)
52709 Dilution Buffer, 100 ml (1x)
52057 96 Well Filter Plates, 5 pcs. (2x)
52058 Collection Plates, 10 pcs. (2x)
52059 Pierceable Adhesive Seals, 5 pcs. (2x)

Reagent Kit
• Mobile Phase und Kalibrator enthalten
 

52752/F Reagent Kit
Für 960 Tests

52744 Internal Standard Mix, 50 ml (1x)
52705 Extraction Reagent, 75 ml (2x)
52706 Prep Solution, 25 ml (3x)
52707 Finisher 1, 5 x 0.25 ml (lyoph.) (2x)
52708 Finisher 2, 50 ml (1x)
52709 Dilution Buffer, 100 ml (1x)
52057 96 Well Filter Plates, 5 pcs. (2x)
52058 Collection Plates, 10 pcs. (2x)
52059 Pierceable Adhesive Seals, 5 pcs. (2x)
52100 HPLC Column, 1 pc. (1x)
52001 Mobile Phase A, 1000 ml (10x)
52022 Mobile Phase B, 1000 ml (10x)
52003 Whole Blood Calibration Standard, 5 x 1.0 ml (lyoph.) (5x)
Weitere Informationen
Analysenmethode HPLC
Anzahl der Tests 960
Hinweis Die hier aufgeführten Informationen einschließlich der Probenvorbereitung sind für die Verwendung des Produkts nicht ausreichend. Bitte lesen Sie die Angaben in der Arbeitsvorschrift. Dort befinden sich detaillierte Informationen zu Limitationen, die mit der Verwendung des Produkts gemäß seiner Zweckbestimmung verbunden sind. Detaillierte Daten zur Leistungsbewertung finden Sie im Anhang der Arbeitsvorschrift.
Untere und obere Bestimmungsgrenze

TPP 4,2 – 750 µg/l (Vollblut)
PLP 1,1 – 500 µg/l (Vollblut)

Probenmaterial Vollblut
Probenvorbereitung

Die hier aufgeführten Informationen zur Probenvorbereitung sind für die Verwendung im Labor nicht ausreichend. Eine detaillierte Schritt-für-Schritt-Beschreibung finden Sie in der Arbeitsvorschrift.

  • 100 μl Vollblut/Kalibrator/Kontrolle und 50 μl Internal Standard Mix in eine 96-Well-Collection Plate geben.
  • 150 μl Extraction Reagent zugeben und 4 min schütteln.
  • Niederschlag durch Zentrifugation abtrennen (3 min, 2000 x g).
  • 75 μl Überstand in eine 96 Well Filterplatte überführen.
  • 75 μl Prep Solution und 50 μl der Finisher-Lösung zugeben.
  • 30 s mischen.
  • Niederschlag durch Zentrifugation abtrennen (2,5 min, 1500 x g).
  • Den Überstand 45 min bei 60 °C inkubieren.
  • 100 μl Dilution Solution hinzufügen und kurz mischen (30 s).
  • Verschließen der Platte und Transfer zum Autosampler.
Laufzeit 9 min
Injektionsvolumen 25 µl
Flussrate 1,5–2,3 ml/min
Säulentemperatur +20 bis +25 °C
Messwellenlängen

Start mit EX 320 nm, EM 415 nm
Nach ca. 3,8 min auf EX 367 nm, EM 435 nm umschalten

Zus. Informationen Es eignet sich jedes gängige HPLC-System mit binärer Pumpe und programmierbarem Fluoreszenz-Detektor.
Parameter Vitamin B1 (TPP, Thiaminpyrophosphat), Vitamin B6 (PLP, Pyridoxal-5’-phosphat)

Vitamin B1 and Vitamin B6 in Whole Blood – HPLC Reagent Kit (52752/F)
For 960 tests

Order No. Reagent Kit components (Quantities in kit)
52001 Mobile Phase A, 1000 ml (10x)
52022 Mobile Phase B, 1000 ml (10x)
52003 Whole Blood Calibration Standard, 5 x 1.0 ml (lyoph.) (5x)
52744 Internal Standard Mix, 50 ml (1x)
52705 Extraction Reagent, 75 ml (2x)
52706 Prep Solution, 25 ml (3x)
52707 Finisher 1, 5 x 0.25 ml (lyoph.) (2x)
52708 Finisher 2, 50 ml (1x)
52709 Dilution Buffer, 100 ml (1x)
52057 96 Well Filter Plates, 5 pcs. (2x)
52058 Collection Plates, 10 pcs. (2x)
52059 Pierceable Adhesive Seals, 5 pcs. (2x)
52100 HPLC Column, 1 pc. (1x)

 

Order No. Required components (not included in the Reagent Kit)
0165 Vitamin B1/B6 Whole Blood Control, Level I, 5 x 2.0 ml (lyoph.)
0167 Vitamin B1/B6 Whole Blood Control, Level II, 5 x 2.0 ml (lyoph.)

 

Order No. Lab equipment
15010 PEEK Prefilter Housing, 1 pc.
15011 PEEK-encased Prefilter, 2 µm, 5 pcs.
18001 Precolumn Cartridge Holder 4/10, 1 pc.
18010 Precolumn Cartridge 4/10, 1 pc.
Die folgenden Komponenten sind im Kit enthalten:
Als Kunde können Sie sich für den kompletten Zugang bitte hier anmelden oder neu registrieren.