25-OH-Vitamin D3/D2 im Serum/Plasma - HPLC

Bestell-Nr.: 38038, für 100 Tests
Parameter:
25-OH-Vitamin D2, 25-OH-Vitamin D3

Kombinierte Analytik von Vitamin D3 und D2
Verbesserte Trennung
Qualitätskontrollen und Kalibrator erhältlich

25-OH-Vitamin D2

25-OH-Vitamin D3

Klinische Relevanz

Vitamin D (Cholecalciferol, Colecalciferol oder kurz Calciol) ist eine anerkannte klinisch-chemische Messgröße im Zusammenhang mit Osteoporose und Osteopenie (Minderung der Knochendichte). Darüber hinaus spielt es eine Rolle bei der Immunantwort, bei kardiovaskulären Erkrankungen und bestimmten Krebsarten. Daher ist die Diagnostik von Vitamin D aus unterschiedlicher Sicht von großer Bedeutung.

25-OH-Vitamin D3 ist der Hauptmetabolit im menschlichen Organismus und direkte Vorstufe der physiologisch aktiven Form 1,25-(OH)2-Vitamin D3. Vitamin-D-Mangel wird in erster Linie durch Nahrungsergänzung mit Vitamin D3 oder Vitamin D2 therapiert. Vitamin D2 ist synthetisch einfacher herzustellen und als Supplement außerhalb der EU und vor allem in den USA verbreitet. Daher ist seine Bestimmung im Serum/Plasma ebenfalls relevant.

 

Produktvorteile

  • Kombinierte Analytik von Vitamin D3 und D2
  • Zuverlässige Trennung
  • Sichere Quantifizierung mit stabilem internen Standard

 

Dieser Kit von Chromsystems erlaubt die sichere und simultane chromatographische Bestimmung von 25-OH-Vitamin D3 und 25-OH-Vitamin D2 in einem isokratischen HPLC-Lauf mit UV-Detektion. Durch eine effektive Proteinfällung und eine selektive Festphasenextraktion werden störende Komponenten abgetrennt. Zur sicheren Quantifizierung wird als stabiler interner Standard ein nicht-physiologisches Vitamin D-Derivat verwendet. So werden mit niedrigem Zeit- und Kostenaufwand reproduzierbare und zuverlässige Ergebnisse erzielt.

Chromsystems bietet alternativ für hohen Probendurchsatz eine Online-Methode mit selektiver Online-Festphasenextraktion an (Best.-Nr. 38900/1000) sowie Methoden zur Bestimmung mittels Massenspektrometrie (Best.-Nr. 62000).

Weitere Informationen
Anzahl der Bestimmungen 100
Bestimmungsgrenzen

1,1 µg/l - 1,4 µg/l

Linearität bis mind. 250 µg/l
Wiederfindungsrate 25-OH-Vitamin D3: 86 %; 25-OH-Vitamin D2: 87 %
Intraassay

25-OH-Vitamin D3: Vk 3.0 %
25-OH-Vitamin D2: Vk 1,8 %

Interassay

25-OH-Vitamin D3: Vk 3,3 %
25-OH-Vitamin D2: Vk 4,6 %

Analysendauer 10 min
Probenvorbereitung
  • 500 µl Serum/Plasma und 50 µl Internal Standard in lichtgeschütztem Reaktionsgefäß kurz mischen.
  • 500 µl Precipitation Reagent zugeben, 20 s vortexen.
  • 10 Minuten auf +4 °C abkühlen.
  • 5 Minuten bei 13 000 U/min zentrifugieren.
  • Probenüberstand vollständig auf die Probenvorbereitungssäule geben, durchzentrifugieren/-saugen, Durchlauf verwerfen.
  • 2 x 1 ml Wash Buffer 1 durch die Probenvorbereitungssäule zentrifugieren/-saugen, Durchläufe verwerfen.
  • 75 µl Wash Buffer 2 durch die Probenvorbereitungssäule zentrifugieren/-saugen, Durchlauf verwerfen.
  • 25-OH-Vitamin D3 und D2 mit 200 µl Elution Buffer eluieren und mit 20 µl dest. Wasser verdünnen.
  • 25 µl Eluat in das HPLC-System injizieren.
Probenstabilität Bei Raumtemperatur bis zu 3 Tage, bei +2 bis +8 °C bis zu 1 Woche. Es wird empfohlen, die Proben gekühlt zu versenden. Für längere Lagerung (max. 1 Jahr) bei -20 °C einfrieren.
Probenmaterial Serum/Plasma
Injektionsvolumen 25 µl (10-50 µl)
Flussrate 0,7 ml/min
Säulentemperatur ca. 25 °C
Messwellenlänge 265 nm
Hinweis Bitte beachten Sie, dass die frei zugänglichen Informationen dieser Website, insbesondere auch der Probenvorbereitung, nicht zur Verwendung der Produkte ausreichen. Bitte lesen Sie dazu die Anweisungen und Warnhinweise auf Produkten und/oder in der Arbeitsvorschrift.
Method of Analysis HPLC
Parameter 25-OH-Vitamin D2, 25-OH-Vitamin D3
Complete Specification
Linearität: bis mind. 250 µg/l
Bestimmungsgrenze: D3: 1,4 µg/l
D2: 1,1 µg/l
Wiederfindungsrate: D3: 86 %
D2: 87 %
Intra-Assay: Vk 0,8-3,0 %
Inter-Assay: Vk 1,9-4,6 %
Injektionsintervall: 12 min

HPLC-Parameter

Isokratisches HPLC-System mit UV-Detektor.

Injektionsvolumen: 25 µl (10-50 µl)
Flussrate: 0,7 ml/min
Messwellenlänge: 265 nm
Säulentemperatur: ca. 25 °C
Autosampler-Spüllösung: Wasser:Acetonitril = 50:50
Zusätzliche Informationen Isokratisches HPLC-System mit UV-Detektor.
Injektionsintervall 12 min
Autosampler-Spüllösung Wasser:Acetonitril = 50:50
  1. 38031 HPLC mobile phase vitamin D3 vitamin D2 serum plasma
    Mobile Phase
    Bestell-Nr.: 38031
    25-OH-Vitamin D3/D2 im Serum/Plasma - HPLC
    Details
  2. 38031 HPLC mobile phase vitamin D3 vitamin D2 serum plasma
    Mobile Phase, 10 x 1000 ml
    Bestell-Nr.: 38032
    25-OH-Vitamin D3/D2 im Serum/Plasma - HPLC
    Details
  3. 38033 HPLC serum calibration standard vitamin D3 vitamin D2
    Vitamin D3/D2 Serum Calibration Standard
    Bestell-Nr.: 38033
    25-OH-Vitamin D3/D2 im Serum/Plasma - HPLC
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  4. 38004 HPLC internal standard vitamin D3 vitamin D2 serum plasma
    Internal Standard
    Bestell-Nr.: 38004
    25-OH-Vitamin D3/D2 im Serum/Plasma - HPLC
    Details
  5. 38005 HPLC precipitation reagent vitamin D3 vitamin D2 serum plasma
    Precipitation Reagent
    Bestell-Nr.: 38005
    25-OH-Vitamin D3/D2 im Serum/Plasma - HPLC
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  6. 38006 HPLC wash buffer vitamin D3 vitamin D2 serum plasma
    Wash Buffer 1
    Bestell-Nr.: 38006
    25-OH-Vitamin D3/D2 im Serum/Plasma - HPLC
    Details
  7. 38007 HPLC wash buffer vitamin D3 vitamin D2 serum plasma
    Wash Buffer 2
    Bestell-Nr.: 38007
    25-OH-Vitamin D3/D2 im Serum/Plasma - HPLC
    Details
  8. 38009 HPLC elution buffer vitamin D3 vitamin D2 serum plasma
    Elution Buffer
    Bestell-Nr.: 38009
    25-OH-Vitamin D3/D2 im Serum/Plasma - HPLC
    Details
  9. 38008 HPLC sample clean up columns vitamin D3 vitamin D2 serum plasma
    Sample Clean Up Columns
    Bestell-Nr.: 38008
    25-OH-Vitamin D3/D2 im Serum/Plasma - HPLC
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    Reaktionsgefäße
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    Bernsteinfarben für Lichtschutz
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  3. PEEK-Vorfiltergehäuse
    PEEK-Vorfiltergehäuse
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  5. Vorsäulenkartusche 4/10
    Vorsäulenkartusche 4/10
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