MassTox® Immunsuppressiva im Vollblut – ONEMinute Test - LC-MS/MS

Klinische Relevanz

Immunsuppressiva unterdrücken die Aktivität des Immunsystems, um so Abstoßungsreaktionen nach Organtransplantationen zu verhindern. Darüber hinaus werden sie bei Autoimmunerkrankungen als Medikamente eingesetzt. Für die Therapieüberwachung nach Organtransplantationen ist das therapeutische Drug-Monitoring unverzichtbar. Neben der Mycophenolsäure sind die am häufigsten nach Transplantation eingesetzten Immunsuppressiva Cyclosporin A (INN: Ciclosporin), Tacrolimus (FK506), Sirolimus und Everolimus. Cyclosporin A und Tacrolimus unterdrücken die für die Immunantwort erforderliche Signaltransduktion durch Hemmung von Calcineurin. Es steuert z.B. die Synthese von Interleukinen in den T-Zellen bei einer Immunantwort. Dagegen sind Sirolimus und dessen Derivat Everolimus calcineurin-unabhängig und hemmen mTOR (mammalian target of rapamycin), ein für die Signalübertragung wichtiges Enzym bei der Immunantwort.

Zur quantitativen Bestimmung dieser Immunsuppressiva sollte nur die LC-MS/MS eingesetzt werden, da immunologische Verfahren sich in Selektivität und Spezifität mitunter deutlich unterscheiden und teilweise auch unwirksame Metaboliten erfassen. Außerdem spielt bei der Analytik dieser Immunsuppressiva die Kompensation von Matrixeffekten eine entscheidende Rolle für die diagnostische Bestimmung aus Vollblut, einer komplexen Matrix. Zur genauen und sicheren Quantifizierung ist daher eine deutliche Reduzierung der Störungen unbedingt erforderlich.

Produktvorteile

• Zuverlässige Eliminierung von Matrixeffekten
• Hohe Empfindlichkeit und Spezifität
• Sehr kurze Analysenzeit von 1-2 min
• Optional: Automatisierte Probenvorbereitung

Der ONEMINUTE MassTox® Kit für die Analytik der vier Immunsuppressiva liefert robuste, präzise und reproduzierbare Ergebnisse – und das schon nach einer Laufzeit von 1-2 Minuten je Probe. Gerade für Labore mit einem großen Probendurchsatz ist die ONEMINUTE-Methode zeitsparend. Die manuelle Probenvorbereitung ist reduziert auf eine einfache und effektive Proteinfällung. Die Anreicherung der Analyte und Eliminierung weiterer Störsubstanzen erfolgt ONLINE über eine Trap-Säule, mit der Matrixeffekte drastisch minimiert werden. Isotopenmarkierte interne Standards kompensieren verbleibende Ionensuppression vollständig. Über ein einfaches Säulenschaltsystem ist die Trap-Säule mit der HPLC-Säule und dem MS/MS-System verbunden. Der zusätzliche Einsatz von 6PLUS1® Multilevel-Kalibratoren und der MassCheck® Kontrollen gewährleistet eine hohe Genauigkeit der Ergebnisse.

Ergänzend ist diese Analytik auch als automatisierte Methode erhältlich, die vollständig für alle gängigen Tandem-Massenspektrometer validiert ist.

Außerdem gibt es von Chromsystems auch eine Standardmethode zur Bestimmung der Immunsuppressiva im Vollblut (Best.-Nr. 93000).

Inhalt für 400 Tests (93900/400)
Mobile Phase A, 2x 900 ml
Mobile Phase B, 450 ml
Precipitation Reagent, 100 ml
Internal Standard Set, 1 Set
Extraction Buffer, 40 ml
Rinsing Solution, 1000 ml
Reaction Vials, transparent, 4 x 100 Stück

Inhalt für 1200 Tests (93900/1200)
Mobile Phase A, 5 x 900 ml
Mobile Phase B, 3 x 450 ml
Precipitation Reagent, 3 x 100 ml
Internal Standard Set, 3 x 1 Set
Extraction Buffer, 3 x 40 ml
Rinsing Solution, 2 x 1000 ml
Reaction Vials, transparent, 12 x 100 Stück
6PLUS1® Multilevel Calibrator Set Immunosuppressants (XL), 7 x 2 ml
Analytical Column, 1 Stück
Trap Column, 2 Stück