Vitamin B1 im Vollblut - HPLC Basic Kit

Bestell-Nr.: 35000-BK
Parameter:
Vitamin B1 (TPP, Thiaminpyrophosphat)
Assay validiert nach IVDR (=> Konformitätserklärung)

Vitamin B1 (TPP, thiamine pyrophosphate)

Klinische Relevanz

Vitamin B1 (Thiamin) spielt eine wichtige Rolle bei der Energiegewinnung aus Kohlenhydraten und Fetten. Die aktive Form ist das Thiaminpyrophosphat (TPP), ein Coenzym für einige enzymatische Reaktionen des Kohlenhydratstoffwechsels sowie für die Pyruvat-Decarboxylase. TPP ist außerdem beim oxidativen Glucoseabbau maßgeblich beteiligt. Die Bestimmung der Konzentration von TPP ist aussagekräftiger als Messungen des Gesamtthiamins, da so ausschließlich die physiologisch wirksame Form berücksichtigt wird.

Der Thiamin-Bedarf ist aufgrund seiner zentralen Bedeutung beim Energiestoffwechsel eng mit der Kalorienzufuhr verknüpft: je mehr Energie beispielsweise beim Leistungssport gebraucht wird, desto mehr Thiamin muss die Nahrung enthalten. Es verhindert auch eine Anhäufung von giftigen Nebenprodukten, die stoffwechselbedingt in Zellen entstehen und Herz oder Nervensystem schädigen könnten.

 

Assay-Charakteristika
Mit diesem Chromsystems-Kit wird TPP schnell und einfach direkt aus dem Vollblut bestimmt. Der Kit ist für isokratische HPLC-Systeme mit Fluoreszenz-Detektor optimiert. Die für die Floureszenzdetektion notwendige Derivatisierung erfolgt während der Probenvorbereitung – eine geräteaufwändige Nachsäulen-Derivatisierung für die Fluoreszenzdetektion entfällt. Eine spezielle HPLC-Säule und eine optimierte mobile Phase erlauben eine sichere und zuverlässige Quantifizierung in weniger als 6 Minuten.

Detaillierte Daten zur Leistungsbewertung finden Sie in den Anhängen II und III der Arbeitsvorschrift.

 

Zwei Kit-Typen verfügbar

Basic Kit
• Nur Probenvorbereitungsreagenzien und Vials enthalten
• Keine überschüssigen Mengen an mobiler Phase und Kalibrator

35000-BK Basic Kit
Für 100 Probenvorbereitungen

37003 Extraction Buffer, 10 ml (1x)
37004 Precipitation Reagent, 30 ml (1x)
35005 Derivatisation Reagent 1, 5 x 0.3 ml (1x)
35006 Derivatisation Reagent 2, 20 ml (1x)
35007 Stabilisation Buffer, 10 ml (1x)
35009 Neutralisation Buffer, 10 ml (1x)
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour (light protection), 100 pcs. (2x)

Reagent Kit
• Mobile Phase und Kalibrator enthalten
 

35000 Reagent Kit
Für 100 Tests

37003 Extraction Buffer, 10 ml (1x)
37004 Precipitation Reagent, 30 ml (1x)
35005 Derivatisation Reagent 1, 5 x 0.3 ml (1x)
35006 Derivatisation Reagent 2, 20 ml (1x)
35007 Stabilisation Buffer, 10 ml (1x)
35009 Neutralisation Buffer, 10 ml (1x)
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour (light protection), 100 pcs. (2x)
35021 Mobile Phase, 1000 ml, (1x)
37008 Whole Blood Calibration Standard, 5 x 1 ml (lyoph.), (1x)
Weitere Informationen
Analysenmethode HPLC
Probenvorbereitungen 100
Hinweis Die hier aufgeführten Informationen inkl. der Probenvorbereitung sind für die Verwendung des Produkts nicht ausreichend. Bitte lesen Sie die Angaben in der Arbeitsvorschrift. Dort befinden sich detaillierte Informationen zu Limitationen, die mit der Verwendung des Produkts gemäß seiner Zweckbestimmung verbunden sind. Detaillierte Daten zur Leistungsbewertung finden Sie in den Anhängen II und III der Arbeitsvorschrift.
Untere und obere Bestimmungsgrenze 0,8 – 750 μg/l
Probenmaterial Vollblut
Probenvorbereitung

Die hier aufgeführten Informationen zur Probenvorbereitung sind für die Verwendung im Labor nicht ausreichend. Eine detaillierte Schritt-für-Schritt-Beschreibung finden Sie in der Arbeitsvorschrift.

• 200 μl Vollblut/Kalibrator/Kontrolle + 100 μl Extraction Buffer in einem Reaktionsgefäß zusammengeben.
• 2 s schütteln (Vortex).
• 300 μl Precipitation Reagent zusetzen, 30 s schütteln (Vortex).
• 5 min bei 9000 x g zentrifugieren.
• 200 μl Derivatisierungslösung in einem separaten Reaktionsgefäß vorlegen.
• 100 μl des Überstands zugeben und gut durchmischen.
• 100 μl Neutralisation Buffer zugeben.
• 100 μl Stabilisation Buffer zugeben und mischen.
• Nach frühestens 20 min 50 μl in das HPLC-System injizieren.

Laufzeit 6 min
Injektionsvolumen 50 µl
Flussrate 1 ml/min
Säulentemperatur +20 bis +25 °C
Gradient isokratisch
Messwellenlängen

EX 367 nm
EM 435 nm

Zus. Info Es eignet sich jedes gängige isokratische HPLC-System mit Fluoreszenz-Detektor.
Parameter Vitamin B1 (TPP, Thiaminpyrophosphat)

35000-BK Vitamin B1 in Whole Blood – HPLC Basic Kit
For 100 sample preparations

Order No. Reagent Kit components (Quantities in kit)
37003 Extraction Buffer, 10 ml (1x)
37004 Precipitation Reagent, 30 ml (1x)
35005 Derivatisation Reagent 1, 5 x 0.3 ml (1x)
35006 Derivatisation Reagent 2, 20 ml (1x)
35007 Stabilisation Buffer, 10 ml (1x)
35009 Neutralisation Buffer, 10 ml (1x)
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour (light protection), 100 pcs. (2x)

 

Order No. Required components (not included in the Basic Kit)
35021 Mobile Phase, 1000 ml
37008 Whole Blood Calibration Standard, 5 x 1 ml (lyoph.)
35110 HPLC Column, equilibrated, with test chromatogram, 1 pc.
0034 Vitamin B1/B2 Whole Blood Control, Level I, 5 x 2 ml
0035 Vitamin B1/B2 Whole Blood Control, Level II, 5 x 2 ml

 

Order No. Lab equipment
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour (light protection), 100 pcs.
15010 PEEK Prefilter Housing, 1 pc.
15009 PEEK-encased Prefilter, 5 µm, 5 pcs.
18001 Precolumn Cartridge Holder 4/10, 1 pc.
18010 Precolumn Cartridge 4/10, 1 pc.
Die folgenden Komponenten sind im Kit enthalten:
Die folgenden Produkte sind nicht im Kit enthalten, werden aber für die Anwendung der Methode benötigt:
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Vitamin B1 (TPP, thiamine pyrophosphate)

Klinische Relevanz

Vitamin B1 (Thiamin) spielt eine wichtige Rolle bei der Energiegewinnung aus Kohlenhydraten und Fetten. Die aktive Form ist das Thiaminpyrophosphat (TPP), ein Coenzym für einige enzymatische Reaktionen des Kohlenhydratstoffwechsels sowie für die Pyruvat-Decarboxylase. TPP ist außerdem beim oxidativen Glucoseabbau maßgeblich beteiligt. Die Bestimmung der Konzentration von TPP ist aussagekräftiger als Messungen des Gesamtthiamins, da so ausschließlich die physiologisch wirksame Form berücksichtigt wird.

Der Thiamin-Bedarf ist aufgrund seiner zentralen Bedeutung beim Energiestoffwechsel eng mit der Kalorienzufuhr verknüpft: je mehr Energie beispielsweise beim Leistungssport gebraucht wird, desto mehr Thiamin muss die Nahrung enthalten. Es verhindert auch eine Anhäufung von giftigen Nebenprodukten, die stoffwechselbedingt in Zellen entstehen und Herz oder Nervensystem schädigen könnten.

 

Assay-Charakteristika
Mit diesem Chromsystems-Kit wird TPP schnell und einfach direkt aus dem Vollblut bestimmt. Der Kit ist für isokratische HPLC-Systeme mit Fluoreszenz-Detektor optimiert. Die für die Floureszenzdetektion notwendige Derivatisierung erfolgt während der Probenvorbereitung – eine geräteaufwändige Nachsäulen-Derivatisierung für die Fluoreszenzdetektion entfällt. Eine spezielle HPLC-Säule und eine optimierte mobile Phase erlauben eine sichere und zuverlässige Quantifizierung in weniger als 6 Minuten.

Detaillierte Daten zur Leistungsbewertung finden Sie in den Anhängen II und III der Arbeitsvorschrift.

 

Zwei Kit-Typen verfügbar

Basic Kit
• Nur Probenvorbereitungsreagenzien und Vials enthalten
• Keine überschüssigen Mengen an mobiler Phase und Kalibrator

35000-BK Basic Kit
Für 100 Probenvorbereitungen

37003 Extraction Buffer, 10 ml (1x)
37004 Precipitation Reagent, 30 ml (1x)
35005 Derivatisation Reagent 1, 5 x 0.3 ml (1x)
35006 Derivatisation Reagent 2, 20 ml (1x)
35007 Stabilisation Buffer, 10 ml (1x)
35009 Neutralisation Buffer, 10 ml (1x)
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour (light protection), 100 pcs. (2x)

Reagent Kit
• Mobile Phase und Kalibrator enthalten
 

35000 Reagent Kit
Für 100 Tests

37003 Extraction Buffer, 10 ml (1x)
37004 Precipitation Reagent, 30 ml (1x)
35005 Derivatisation Reagent 1, 5 x 0.3 ml (1x)
35006 Derivatisation Reagent 2, 20 ml (1x)
35007 Stabilisation Buffer, 10 ml (1x)
35009 Neutralisation Buffer, 10 ml (1x)
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour (light protection), 100 pcs. (2x)
35021 Mobile Phase, 1000 ml, (1x)
37008 Whole Blood Calibration Standard, 5 x 1 ml (lyoph.), (1x)
Weitere Informationen
Analysenmethode HPLC
Probenvorbereitungen 100
Hinweis Die hier aufgeführten Informationen inkl. der Probenvorbereitung sind für die Verwendung des Produkts nicht ausreichend. Bitte lesen Sie die Angaben in der Arbeitsvorschrift. Dort befinden sich detaillierte Informationen zu Limitationen, die mit der Verwendung des Produkts gemäß seiner Zweckbestimmung verbunden sind. Detaillierte Daten zur Leistungsbewertung finden Sie in den Anhängen II und III der Arbeitsvorschrift.
Untere und obere Bestimmungsgrenze 0,8 – 750 μg/l
Probenmaterial Vollblut
Probenvorbereitung

Die hier aufgeführten Informationen zur Probenvorbereitung sind für die Verwendung im Labor nicht ausreichend. Eine detaillierte Schritt-für-Schritt-Beschreibung finden Sie in der Arbeitsvorschrift.

• 200 μl Vollblut/Kalibrator/Kontrolle + 100 μl Extraction Buffer in einem Reaktionsgefäß zusammengeben.
• 2 s schütteln (Vortex).
• 300 μl Precipitation Reagent zusetzen, 30 s schütteln (Vortex).
• 5 min bei 9000 x g zentrifugieren.
• 200 μl Derivatisierungslösung in einem separaten Reaktionsgefäß vorlegen.
• 100 μl des Überstands zugeben und gut durchmischen.
• 100 μl Neutralisation Buffer zugeben.
• 100 μl Stabilisation Buffer zugeben und mischen.
• Nach frühestens 20 min 50 μl in das HPLC-System injizieren.

Laufzeit 6 min
Injektionsvolumen 50 µl
Flussrate 1 ml/min
Säulentemperatur +20 bis +25 °C
Gradient isokratisch
Messwellenlängen

EX 367 nm
EM 435 nm

Zus. Info Es eignet sich jedes gängige isokratische HPLC-System mit Fluoreszenz-Detektor.
Parameter Vitamin B1 (TPP, Thiaminpyrophosphat)

35000-BK Vitamin B1 in Whole Blood – HPLC Basic Kit
For 100 sample preparations

Order No. Reagent Kit components (Quantities in kit)
37003 Extraction Buffer, 10 ml (1x)
37004 Precipitation Reagent, 30 ml (1x)
35005 Derivatisation Reagent 1, 5 x 0.3 ml (1x)
35006 Derivatisation Reagent 2, 20 ml (1x)
35007 Stabilisation Buffer, 10 ml (1x)
35009 Neutralisation Buffer, 10 ml (1x)
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour (light protection), 100 pcs. (2x)

 

Order No. Required components (not included in the Basic Kit)
35021 Mobile Phase, 1000 ml
37008 Whole Blood Calibration Standard, 5 x 1 ml (lyoph.)
35110 HPLC Column, equilibrated, with test chromatogram, 1 pc.
0034 Vitamin B1/B2 Whole Blood Control, Level I, 5 x 2 ml
0035 Vitamin B1/B2 Whole Blood Control, Level II, 5 x 2 ml

 

Order No. Lab equipment
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour (light protection), 100 pcs.
15010 PEEK Prefilter Housing, 1 pc.
15009 PEEK-encased Prefilter, 5 µm, 5 pcs.
18001 Precolumn Cartridge Holder 4/10, 1 pc.
18010 Precolumn Cartridge 4/10, 1 pc.
Die folgenden Komponenten sind im Kit enthalten:
Die folgenden Produkte sind nicht im Kit enthalten, werden aber für die Anwendung der Methode benötigt:
Als Kunde können Sie sich für den kompletten Zugang bitte hier anmelden oder neu registrieren.