Vitamin B6 im Vollblut – HPLC Reagent Kit

Bestell-Nr.: 31000/WB, für 100 Tests
Parameter:
Vitamin B6 (PLP, Pyridoxal-5’-phosphat)

Assay validiert nach IVDR (=> Konformitätserklärung)

Vitamin B6 (PLP, Pyridoxal-5’-phosphat)

Klinische Relevanz

Vitamin B6 umfasst Pyridoxin, Pyridoxamin und Pyridoxal sowie deren Phosphatderivate. Pyridoxal-5’-Phosphat (PLP) ist die aktive Coenzymform und an nahezu hundert enzymatischen Reaktionen beteiligt. Dazu gehören unter anderem die Synthese und der Abbau von Aminosäuren, die Verstoffwechselung von Aminosäuren zu Kohlenhydraten und der Fettsäuremetabolismus. Vitamin B6 ist außerdem bei der Weiterleitung von Neurotransmittern wie Serotonin und Dopamin erforderlich sowie bei der Biosynthese von bestimmten Porphyrinen. Der Bedarf an Vitamin B6 ist unter anderem von der Menge an konsumierten Proteinen abhängig.

Vitamin B6 kommt in vielen Nahrungsmitteln vor, so dass Mangelerscheinungen selten sind. Dennoch kann bei einseitiger Ernährung ein Mangel gemeinsam mit anderen wasserlöslichen Vitaminen auftreten. Dabei kann es zu einer Vielzahl an Symptomen kommen, wie Wachstumsstörungen, Anämien durch Störungen in der Häm-Synthese, chronische Entzündungen der Zunge oder Dermatitis. Es gibt auch viele Stoffwechselstörungen aufgrund eines Vitamin-B6-Mangels wie beispielsweise der Homocysteinämie.

Eine Überdosierung durch natürliche Nahrungsmittel ist praktisch nicht möglich und kommt daher nur bei übermäßiger Supplementierung vor. Sie führt dann zur Photosensitivität oder zu bestimmten Neuropathien. Bei Säuglingen sind auch Tachykardie und periphere Durchblutungsstörungen beschrieben.

 

Assay-Charakteristika
Mit diesem Kit für die HPLC wird PLP aus Plasma oder Serum einfach und sicher bestimmt. Die Probenvorbereitung beginnt mit einer effektiven Proteinfällung und der Abspaltung des proteinösen Holoenzyms. Durch anschließende Derivatisierung entsteht eine fluoreszierende PLP-Verbindung. Die chromatographische Messung erfolgt isokratisch mit Fluoreszenzdetektion.

Chromsystems bietet auch weitere Methoden mittels HPLC und UHPLC zur kombinierten Analytik von Vitamin B6 mit Vitamin B1 an.


Zwei Kit-Typen verfügbar

Basic Kit
• Nur Probenvorbereitungsreagenzien und Vials enthalten
• Keine überschüssigen Mengen an mobiler Phase und Kalibrator

31000-BK Basic Kit
Für 100 Probenvorbereitungen

31004 Precipitation Reagent, 30 ml (1x)
31005 Neutralisation Buffer, 25 ml (1x)
31006 Derivatisation Reagent, 10 ml (1x)
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour (light protection), 100 pcs. (2x)

Reagent Kit
• Mobile Phase und Kalibrator enthalten
 

31000/WB Reagent Kit
Für 100 Tests

31004 Precipitation Reagent, 30 ml (1x)
31005 Neutralisation Buffer, 25 ml (1x)
31006 Derivatisation Reagent, 10 ml (1x)
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour (light protection), 100 pcs. (2x)
31001 Mobile Phase, 1000 ml, (1x)
31003 Whole Blood Calibration Standard, 5 x 1 ml (lyoph.), (1x)
Weitere Informationen
Analysenmethode HPLC
Anzahl der Tests 100
Hinweis Die hier aufgeführten Informationen einschließlich der Probenvorbereitung sind für die Verwendung des Produkts nicht ausreichend. Bitte lesen Sie die Angaben in der Arbeitsvorschrift. Dort befinden sich detaillierte Informationen zu Limitationen, die mit der Verwendung des Produkts gemäß seiner Zweckbestimmung verbunden sind. Detaillierte Daten zur Leistungsbewertung finden Sie im Anhang der Arbeitsvorschrift.
Untere und obere Bestimmungsgrenze 1.0 – 250 µg/l
Probenmaterial Vollblut
Probenvorbereitung

Die hier aufgeführten Informationen zur Probenvorbereitung sind für die Verwendung im Labor nicht ausreichend. Eine detaillierte Schritt-für-Schritt-Beschreibung finden Sie in der Arbeitsvorschrift.

  • 200 μl Vollblut mit 300 μl Precipitation Reagent in lichtgeschütztem Reaktionsgefäß mischen.
  • Mindestens 30 s vortexen.
  • 10 min bei +4 °C inkubieren, anschließend 5 min bei 16 000 x g zentrifugieren.
  • 250 μl des Überstandes in ein neues lichtgeschütztes Reaktionsgefäß überführen.
  • 250 μl Neutralisation Reagent und anschließend 100 μl Derivatisation Reagent (cyanidhaltig) zugeben, kurz mischen.
  • 20 min inkubieren bei 60 °C (Wasserbad).
  • Anschließend Probe 10 min bei +4 °C abkühlen und 2 min bei 16 000 x g zentrifugieren.
  • Überstand in lichtgeschütztes Autosamplergefäß überführen.
  • 25–50 μl in das HPLC-System injizieren.
Laufzeit 8 min
Injektionsvolumen 50 µl
Flussrate 1,0 ml/min
Säulentemperatur +20 bis +25 °C
Messwellenlängen

EX 320 nm
EM 415 nm

Zus. Info

Es eignet sich jedes gängige isokratische HPLC-System mit Fluoreszenz-Detektor.

Parameter Vitamin B6 (PLP, Pyridoxal-5’-phosphat)

Vitamin B6 in Whole Blood – HPLC Reagent Kit (31000/WB)
For 100 tests

Order No. Reagent Kit components (Quantities in kit)
31001 Mobile Phase, 1000 ml, (1x)
31003 Whole Blood Calibration Standard, 5 x 1 ml (lyoph.), (1x)
31004 Precipitation Reagent, 30 ml (1x)
31005 Neutralisation Buffer, 25 ml (1x)
31006 Derivatisation Reagent, 10 ml (1x)
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour (light protection), 100 pcs. (2x)

 

Order No. Required components (not included in the Reagent Kit)
31110 HPLC Column, equilibrated, with test chromatogram, 1 pc.
0023 Vitamin B6 Whole Blood Control, Level I (lyoph.), 5 x 2 ml
0024 Vitamin B6 Whole Blood Control, Level II (lyoph.), 5 x 2 ml

 

Order No. Lab equipment
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour (light protection), 100 pcs.
15010 PEEK Prefilter Housing, 1 pc.
15011 PEEK-encased Prefilter, 2 µm, 5 pcs.
18001 Precolumn Cartridge Holder 4/10, 1 pc.
18010 Precolumn Cartridge 4/10, 1 pc.
Die folgenden Komponenten sind im Kit enthalten:
Die folgenden Produkte sind nicht im Kit enthalten, werden aber für die Anwendung der Methode benötigt:
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Vitamin B6 (PLP, Pyridoxal-5’-phosphat)

Klinische Relevanz

Vitamin B6 umfasst Pyridoxin, Pyridoxamin und Pyridoxal sowie deren Phosphatderivate. Pyridoxal-5’-Phosphat (PLP) ist die aktive Coenzymform und an nahezu hundert enzymatischen Reaktionen beteiligt. Dazu gehören unter anderem die Synthese und der Abbau von Aminosäuren, die Verstoffwechselung von Aminosäuren zu Kohlenhydraten und der Fettsäuremetabolismus. Vitamin B6 ist außerdem bei der Weiterleitung von Neurotransmittern wie Serotonin und Dopamin erforderlich sowie bei der Biosynthese von bestimmten Porphyrinen. Der Bedarf an Vitamin B6 ist unter anderem von der Menge an konsumierten Proteinen abhängig.

Vitamin B6 kommt in vielen Nahrungsmitteln vor, so dass Mangelerscheinungen selten sind. Dennoch kann bei einseitiger Ernährung ein Mangel gemeinsam mit anderen wasserlöslichen Vitaminen auftreten. Dabei kann es zu einer Vielzahl an Symptomen kommen, wie Wachstumsstörungen, Anämien durch Störungen in der Häm-Synthese, chronische Entzündungen der Zunge oder Dermatitis. Es gibt auch viele Stoffwechselstörungen aufgrund eines Vitamin-B6-Mangels wie beispielsweise der Homocysteinämie.

Eine Überdosierung durch natürliche Nahrungsmittel ist praktisch nicht möglich und kommt daher nur bei übermäßiger Supplementierung vor. Sie führt dann zur Photosensitivität oder zu bestimmten Neuropathien. Bei Säuglingen sind auch Tachykardie und periphere Durchblutungsstörungen beschrieben.

 

Assay-Charakteristika
Mit diesem Kit für die HPLC wird PLP aus Plasma oder Serum einfach und sicher bestimmt. Die Probenvorbereitung beginnt mit einer effektiven Proteinfällung und der Abspaltung des proteinösen Holoenzyms. Durch anschließende Derivatisierung entsteht eine fluoreszierende PLP-Verbindung. Die chromatographische Messung erfolgt isokratisch mit Fluoreszenzdetektion.

Chromsystems bietet auch weitere Methoden mittels HPLC und UHPLC zur kombinierten Analytik von Vitamin B6 mit Vitamin B1 an.


Zwei Kit-Typen verfügbar

Basic Kit
• Nur Probenvorbereitungsreagenzien und Vials enthalten
• Keine überschüssigen Mengen an mobiler Phase und Kalibrator

31000-BK Basic Kit
Für 100 Probenvorbereitungen

31004 Precipitation Reagent, 30 ml (1x)
31005 Neutralisation Buffer, 25 ml (1x)
31006 Derivatisation Reagent, 10 ml (1x)
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour (light protection), 100 pcs. (2x)

Reagent Kit
• Mobile Phase und Kalibrator enthalten
 

31000/WB Reagent Kit
Für 100 Tests

31004 Precipitation Reagent, 30 ml (1x)
31005 Neutralisation Buffer, 25 ml (1x)
31006 Derivatisation Reagent, 10 ml (1x)
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour (light protection), 100 pcs. (2x)
31001 Mobile Phase, 1000 ml, (1x)
31003 Whole Blood Calibration Standard, 5 x 1 ml (lyoph.), (1x)
Weitere Informationen
Analysenmethode HPLC
Anzahl der Tests 100
Hinweis Die hier aufgeführten Informationen einschließlich der Probenvorbereitung sind für die Verwendung des Produkts nicht ausreichend. Bitte lesen Sie die Angaben in der Arbeitsvorschrift. Dort befinden sich detaillierte Informationen zu Limitationen, die mit der Verwendung des Produkts gemäß seiner Zweckbestimmung verbunden sind. Detaillierte Daten zur Leistungsbewertung finden Sie im Anhang der Arbeitsvorschrift.
Untere und obere Bestimmungsgrenze 1.0 – 250 µg/l
Probenmaterial Vollblut
Probenvorbereitung

Die hier aufgeführten Informationen zur Probenvorbereitung sind für die Verwendung im Labor nicht ausreichend. Eine detaillierte Schritt-für-Schritt-Beschreibung finden Sie in der Arbeitsvorschrift.

  • 200 μl Vollblut mit 300 μl Precipitation Reagent in lichtgeschütztem Reaktionsgefäß mischen.
  • Mindestens 30 s vortexen.
  • 10 min bei +4 °C inkubieren, anschließend 5 min bei 16 000 x g zentrifugieren.
  • 250 μl des Überstandes in ein neues lichtgeschütztes Reaktionsgefäß überführen.
  • 250 μl Neutralisation Reagent und anschließend 100 μl Derivatisation Reagent (cyanidhaltig) zugeben, kurz mischen.
  • 20 min inkubieren bei 60 °C (Wasserbad).
  • Anschließend Probe 10 min bei +4 °C abkühlen und 2 min bei 16 000 x g zentrifugieren.
  • Überstand in lichtgeschütztes Autosamplergefäß überführen.
  • 25–50 μl in das HPLC-System injizieren.
Laufzeit 8 min
Injektionsvolumen 50 µl
Flussrate 1,0 ml/min
Säulentemperatur +20 bis +25 °C
Messwellenlängen

EX 320 nm
EM 415 nm

Zus. Info

Es eignet sich jedes gängige isokratische HPLC-System mit Fluoreszenz-Detektor.

Parameter Vitamin B6 (PLP, Pyridoxal-5’-phosphat)

Vitamin B6 in Whole Blood – HPLC Reagent Kit (31000/WB)
For 100 tests

Order No. Reagent Kit components (Quantities in kit)
31001 Mobile Phase, 1000 ml, (1x)
31003 Whole Blood Calibration Standard, 5 x 1 ml (lyoph.), (1x)
31004 Precipitation Reagent, 30 ml (1x)
31005 Neutralisation Buffer, 25 ml (1x)
31006 Derivatisation Reagent, 10 ml (1x)
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour (light protection), 100 pcs. (2x)

 

Order No. Required components (not included in the Reagent Kit)
31110 HPLC Column, equilibrated, with test chromatogram, 1 pc.
0023 Vitamin B6 Whole Blood Control, Level I (lyoph.), 5 x 2 ml
0024 Vitamin B6 Whole Blood Control, Level II (lyoph.), 5 x 2 ml

 

Order No. Lab equipment
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour (light protection), 100 pcs.
15010 PEEK Prefilter Housing, 1 pc.
15011 PEEK-encased Prefilter, 2 µm, 5 pcs.
18001 Precolumn Cartridge Holder 4/10, 1 pc.
18010 Precolumn Cartridge 4/10, 1 pc.
Die folgenden Komponenten sind im Kit enthalten:
Die folgenden Produkte sind nicht im Kit enthalten, werden aber für die Anwendung der Methode benötigt:
Als Kunde können Sie sich für den kompletten Zugang bitte hier anmelden oder neu registrieren.