Vitamin B1 im Vollblut und Vitamin B6 im Vollblut / Plasma – HPLC Reagent Kit

Bestell-Nr.: 52052, für 100 Tests
Parameter:
Vitamin B1 (TPP, Thiaminpyrophosphat), Vitamin B6 (PLP, Pyridoxal-5’-phosphat)

Spezifischer interner Standard für jeden Parameter
Keine Nachsäulen-Derivatisierung
Eine Probenvorbereitung und ein Lauf für beide Parameter

Assay validiert nach IVDR (=> Konformitätserklärung)

Vitamin B1 (TPP, Thiaminpyrophosphat)

Vitamin B6 (PLP, Pyridoxal-5’-phosphat)

Klinische Relevanz
Vitamin B1 (Thiamin) spielt eine wichtige Rolle bei der Energiegewinnung aus Kohlenhydraten und Fetten. Die aktive Form ist das Thiaminpyrophosphat (TPP), ein Coenzym für einige enzymatische Reaktionen des Kohlenhydratstoffwechsels sowie für die Pyruvat-Decarboxylase. TPP ist außerdem beim oxidativen Glucoseabbau maßgeblich beteiligt. Die Bestimmung der Konzentration von TPP ist aussagekräftiger als Messungen des Gesamtthiamins, da so ausschließlich die physiologisch wirksame Form berücksichtigt wird.

Vitamin B6 umfasst Pyridoxin, Pyridoxamin und Pyridoxal sowie deren Phosphatderivate. Es wird über die Nahrung aufgenommen und über mehrere enzymatische Umwandlungen in die aktive Form Pyridoxal-5‘-Phosphat (PLP) überführt. PLP ist an nahezu hundert enzymatischen Reaktionen beteiligt, unter anderem als Cofaktor beim Aminosäurestoffwechsel sowie bei der Bildung des roten Blutfarbstoffs und von Neurotransmittern im Gehirn.

 

Produktvorteile
• Spezifischer interner Standard für jeden Parameter
• Keine Nachsäulen-Derivatisierung
• Eine Probenvorbereitung und ein Lauf für beide Parameter

 

Assay-Charakteristika
Dieser Chromsystems-Kit ermöglicht die kombinierte Bestimmung von Vitamin B1 im Vollblut und Vitamin B6 im Vollblut oder Plasma. Die Probenvorbereitung kann aus unterschiedlichen Matrices erfolgen, so dass in einem Durchlauf sowohl Vollblut- als auch Plasmaproben gemessen werden können. Die Derivatisierung der Vitaminmoleküle geschieht bereits bei der Vorbereitung der Probe, so dass die verbreitete Nachsäulen-Derivatisierung hier überflüssig ist. Die Trennung erfolgt mit einem binären Gradienten. Der interne Standard für jeden der beiden Parameter sowie spezielle Qualitätskontrollen gewährleisten eine präzise und sichere Quantifizierung.

Diese Methode ist auch mit einer vereinfachten Probenvorbereitung in Pre-Mixed Tubes erhältlich.

Für Laboratorien mit höherem Probendurchsatz gibt es auch eine Methode mittels UHPLC sowie automatisierte Probenvorbereitung für HPLC- und UHPLC-Methoden.

 

Zwei Kit-Typen verfügbar

Basic Kit
• Nur Probenvorbereitungsreagenzien und Vials enthalten
• Keine überschüssigen Mengen an mobiler Phase und Kalibrator

52052-BK Basic Kit
Für 100 Probenvorbereitungen

52044 Internal Standard, 10 ml (1x)
52005 Precipitation Reagent, 30 ml (1x)
52006 Neutralisation Buffer, 25 ml (1x)
52007 Derivatisation Reagent 1, 2 x 0.3 ml (1x)
52008 Derivatisation Reagent 2, 15 ml (1x)
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour (light protection), 100 pcs. (2x)

Reagent Kit
• Mobile Phase und Kalibrator enthalten
 

52052 Reagent Kit
Für 100 Tests

52044 Internal Standard, 10 ml (1x)
52005 Precipitation Reagent, 30 ml (1x)
52006 Neutralisation Buffer, 25 ml (1x)
52007 Derivatisation Reagent 1, 2 x 0.3 ml (1x)
52008 Derivatisation Reagent 2, 15 ml (1x)
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour (light protection), 100 pcs. (2x)
52011 Mobile Phase A, 1000 ml (1x)
52022 Mobile Phase B, 1000 ml (1x)
52003 Whole Blood Calibration Standard, 5 x 1.0 ml (lyoph.) (1x)
Weitere Informationen
Analysenmethode HPLC
Anzahl der Tests 100
Hinweis Die hier aufgeführten Informationen einschließlich der Probenvorbereitung sind für die Verwendung des Produkts nicht ausreichend. Bitte lesen Sie die Angaben in der Arbeitsvorschrift. Dort befinden sich detaillierte Informationen zu Limitationen, die mit der Verwendung des Produkts gemäß seiner Zweckbestimmung verbunden sind. Detaillierte Daten zur Leistungsbewertung finden Sie im Anhang der Arbeitsvorschrift.
Untere und obere Bestimmungsgrenze

TPP 3,5 – 750 µg/l (Vollblut)
PLP 4,0 – 500 µg/l (Vollblut)
PLP 0,5 – 500 µg/l (Plasma)

Probenmaterial Vollblut / Plasma
Probenvorbereitung

Die hier aufgeführten Informationen zur Probenvorbereitung sind für die Verwendung im Labor nicht ausreichend. Eine detaillierte Schritt-für-Schritt-Beschreibung finden Sie in der Arbeitsvorschrift.

  • 200 μl Vollblut bzw. Plasma mit 100 μl Internal Standard und 300 μl Precipitation Reagent in einem bernsteinfarbenen Reaktionsgefäß zusammengeben (Lichtschutz).
  • 30 s mischen (Vortex)
  • 5 min bei 14000 x g zentrifugieren.
  • In einem neuen lichtgeschützten Reaktionsgefäß 250 μl Neutralisation Reagent und 100 μl Derivatisation Mix vorlegen. 250 μl des Überstandes zugeben.
  • 25 min bei 60°C inkubieren (Wasserbad).
  • Probe 10 min bei +2 bis +8°C abkühlen und anschließend 2 min bei 14000 x g zentrifugieren.
  • Überstand in lichtgeschütztes Autosamplergefäß überführen, 25 μl in das HPLC-System injizieren.
Laufzeit 7 min (Plasma), 9 min (Vollblut)
Injektionsvolumen 25 μl
Flussrate 1,5–2,3 ml/min
Säulentemperatur +20 bis +25 °C
Gradient binär
Messwellenlängen

Start mit EX 320 nm, EM 415 nm,
nach ca. 3,8 min auf EX 367 nm, EM 435 nm umschalten

Zus. Info Es eignet sich jedes gängige HPLC-System mit binärer Pumpe und programmierbarem Fluoreszenz-Detektor.
Parameter Vitamin B1 (TPP, Thiaminpyrophosphat), Vitamin B6 (PLP, Pyridoxal-5’-phosphat)

Vitamin B1 in Whole Blood and Vitamin B6 in Whole Blood / Plasma – HPLC Reagent Kit (52052)
For 100 tests

Order No. Reagent Kit components (Quantities in kit)
52001 Mobile Phase A, 1000 ml (1x)
52022 Mobile Phase B, 1000 ml (1x)
52003 Whole Blood Calibration Standard, 5 x 1.0 ml (lyoph.) (1x)
52044 Internal Standard, 10 ml (1x)
52005 Precipitation Reagent, 30 ml (1x)
52006 Neutralisation Buffer, 25 ml (1x)
52007 Derivatisation Reagent 1, 2 x 0.3 ml (1x)
52008 Derivatisation Reagent 2, 15 ml (1x)
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour, 100 pcs. (2x)

 

Order No. Required components (not included in the Reagent Kit)
52100 HPLC Column, equilibrated, with test chromatogram, 1 pc.
   
  Required for the analysis of vitamin B1 and vitamin B6 in whole blood:
0165 Vitamin B1/B6 Whole Blood Control, Level I, 5 x 2.0 ml (lyoph.)
0167 Vitamin B1/B6 Whole Blood Control, Level II, 5 x 2.0 ml (lyoph.)
   
  Required for the analysis of vitamin B6 in plasma:
36005 Plasma Calibration Standard, 5 x 1.0 ml (lyoph.)
0038 Vitamin B6 Plasma Control, Level I, 5 x 2.0 ml (lyoph.)
0039 Vitamin B6 Plasma Control, Level II, 5 x 2.0 ml (lyoph.)

 

Order No. Lab equipment
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour (light protection), 100 pcs.
15010 PEEK Prefilter Housing, 1 pc.
15011 PEEK-encased Prefilter, 2 µm, 5 pcs.
18001 Precolumn Cartridge Holder 4/10, 1 pc.
18010 Precolumn Cartridge 4/10, 1 pc.
Die folgenden Komponenten sind im Kit enthalten:
Die folgenden Produkte sind nicht im Kit enthalten, werden aber für die Anwendung der Methode benötigt:
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Vitamin B1 (TPP, Thiaminpyrophosphat)

Vitamin B6 (PLP, Pyridoxal-5’-phosphat)

Klinische Relevanz
Vitamin B1 (Thiamin) spielt eine wichtige Rolle bei der Energiegewinnung aus Kohlenhydraten und Fetten. Die aktive Form ist das Thiaminpyrophosphat (TPP), ein Coenzym für einige enzymatische Reaktionen des Kohlenhydratstoffwechsels sowie für die Pyruvat-Decarboxylase. TPP ist außerdem beim oxidativen Glucoseabbau maßgeblich beteiligt. Die Bestimmung der Konzentration von TPP ist aussagekräftiger als Messungen des Gesamtthiamins, da so ausschließlich die physiologisch wirksame Form berücksichtigt wird.

Vitamin B6 umfasst Pyridoxin, Pyridoxamin und Pyridoxal sowie deren Phosphatderivate. Es wird über die Nahrung aufgenommen und über mehrere enzymatische Umwandlungen in die aktive Form Pyridoxal-5‘-Phosphat (PLP) überführt. PLP ist an nahezu hundert enzymatischen Reaktionen beteiligt, unter anderem als Cofaktor beim Aminosäurestoffwechsel sowie bei der Bildung des roten Blutfarbstoffs und von Neurotransmittern im Gehirn.

 

Produktvorteile
• Spezifischer interner Standard für jeden Parameter
• Keine Nachsäulen-Derivatisierung
• Eine Probenvorbereitung und ein Lauf für beide Parameter

 

Assay-Charakteristika
Dieser Chromsystems-Kit ermöglicht die kombinierte Bestimmung von Vitamin B1 im Vollblut und Vitamin B6 im Vollblut oder Plasma. Die Probenvorbereitung kann aus unterschiedlichen Matrices erfolgen, so dass in einem Durchlauf sowohl Vollblut- als auch Plasmaproben gemessen werden können. Die Derivatisierung der Vitaminmoleküle geschieht bereits bei der Vorbereitung der Probe, so dass die verbreitete Nachsäulen-Derivatisierung hier überflüssig ist. Die Trennung erfolgt mit einem binären Gradienten. Der interne Standard für jeden der beiden Parameter sowie spezielle Qualitätskontrollen gewährleisten eine präzise und sichere Quantifizierung.

Diese Methode ist auch mit einer vereinfachten Probenvorbereitung in Pre-Mixed Tubes erhältlich.

Für Laboratorien mit höherem Probendurchsatz gibt es auch eine Methode mittels UHPLC sowie automatisierte Probenvorbereitung für HPLC- und UHPLC-Methoden.

 

Zwei Kit-Typen verfügbar

Basic Kit
• Nur Probenvorbereitungsreagenzien und Vials enthalten
• Keine überschüssigen Mengen an mobiler Phase und Kalibrator

52052-BK Basic Kit
Für 100 Probenvorbereitungen

52044 Internal Standard, 10 ml (1x)
52005 Precipitation Reagent, 30 ml (1x)
52006 Neutralisation Buffer, 25 ml (1x)
52007 Derivatisation Reagent 1, 2 x 0.3 ml (1x)
52008 Derivatisation Reagent 2, 15 ml (1x)
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour (light protection), 100 pcs. (2x)

Reagent Kit
• Mobile Phase und Kalibrator enthalten
 

52052 Reagent Kit
Für 100 Tests

52044 Internal Standard, 10 ml (1x)
52005 Precipitation Reagent, 30 ml (1x)
52006 Neutralisation Buffer, 25 ml (1x)
52007 Derivatisation Reagent 1, 2 x 0.3 ml (1x)
52008 Derivatisation Reagent 2, 15 ml (1x)
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour (light protection), 100 pcs. (2x)
52011 Mobile Phase A, 1000 ml (1x)
52022 Mobile Phase B, 1000 ml (1x)
52003 Whole Blood Calibration Standard, 5 x 1.0 ml (lyoph.) (1x)
Weitere Informationen
Analysenmethode HPLC
Anzahl der Tests 100
Hinweis Die hier aufgeführten Informationen einschließlich der Probenvorbereitung sind für die Verwendung des Produkts nicht ausreichend. Bitte lesen Sie die Angaben in der Arbeitsvorschrift. Dort befinden sich detaillierte Informationen zu Limitationen, die mit der Verwendung des Produkts gemäß seiner Zweckbestimmung verbunden sind. Detaillierte Daten zur Leistungsbewertung finden Sie im Anhang der Arbeitsvorschrift.
Untere und obere Bestimmungsgrenze

TPP 3,5 – 750 µg/l (Vollblut)
PLP 4,0 – 500 µg/l (Vollblut)
PLP 0,5 – 500 µg/l (Plasma)

Probenmaterial Vollblut / Plasma
Probenvorbereitung

Die hier aufgeführten Informationen zur Probenvorbereitung sind für die Verwendung im Labor nicht ausreichend. Eine detaillierte Schritt-für-Schritt-Beschreibung finden Sie in der Arbeitsvorschrift.

  • 200 μl Vollblut bzw. Plasma mit 100 μl Internal Standard und 300 μl Precipitation Reagent in einem bernsteinfarbenen Reaktionsgefäß zusammengeben (Lichtschutz).
  • 30 s mischen (Vortex)
  • 5 min bei 14000 x g zentrifugieren.
  • In einem neuen lichtgeschützten Reaktionsgefäß 250 μl Neutralisation Reagent und 100 μl Derivatisation Mix vorlegen. 250 μl des Überstandes zugeben.
  • 25 min bei 60°C inkubieren (Wasserbad).
  • Probe 10 min bei +2 bis +8°C abkühlen und anschließend 2 min bei 14000 x g zentrifugieren.
  • Überstand in lichtgeschütztes Autosamplergefäß überführen, 25 μl in das HPLC-System injizieren.
Laufzeit 7 min (Plasma), 9 min (Vollblut)
Injektionsvolumen 25 μl
Flussrate 1,5–2,3 ml/min
Säulentemperatur +20 bis +25 °C
Gradient binär
Messwellenlängen

Start mit EX 320 nm, EM 415 nm,
nach ca. 3,8 min auf EX 367 nm, EM 435 nm umschalten

Zus. Info Es eignet sich jedes gängige HPLC-System mit binärer Pumpe und programmierbarem Fluoreszenz-Detektor.
Parameter Vitamin B1 (TPP, Thiaminpyrophosphat), Vitamin B6 (PLP, Pyridoxal-5’-phosphat)

Vitamin B1 in Whole Blood and Vitamin B6 in Whole Blood / Plasma – HPLC Reagent Kit (52052)
For 100 tests

Order No. Reagent Kit components (Quantities in kit)
52001 Mobile Phase A, 1000 ml (1x)
52022 Mobile Phase B, 1000 ml (1x)
52003 Whole Blood Calibration Standard, 5 x 1.0 ml (lyoph.) (1x)
52044 Internal Standard, 10 ml (1x)
52005 Precipitation Reagent, 30 ml (1x)
52006 Neutralisation Buffer, 25 ml (1x)
52007 Derivatisation Reagent 1, 2 x 0.3 ml (1x)
52008 Derivatisation Reagent 2, 15 ml (1x)
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour, 100 pcs. (2x)

 

Order No. Required components (not included in the Reagent Kit)
52100 HPLC Column, equilibrated, with test chromatogram, 1 pc.
   
  Required for the analysis of vitamin B1 and vitamin B6 in whole blood:
0165 Vitamin B1/B6 Whole Blood Control, Level I, 5 x 2.0 ml (lyoph.)
0167 Vitamin B1/B6 Whole Blood Control, Level II, 5 x 2.0 ml (lyoph.)
   
  Required for the analysis of vitamin B6 in plasma:
36005 Plasma Calibration Standard, 5 x 1.0 ml (lyoph.)
0038 Vitamin B6 Plasma Control, Level I, 5 x 2.0 ml (lyoph.)
0039 Vitamin B6 Plasma Control, Level II, 5 x 2.0 ml (lyoph.)

 

Order No. Lab equipment
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour (light protection), 100 pcs.
15010 PEEK Prefilter Housing, 1 pc.
15011 PEEK-encased Prefilter, 2 µm, 5 pcs.
18001 Precolumn Cartridge Holder 4/10, 1 pc.
18010 Precolumn Cartridge 4/10, 1 pc.
Die folgenden Komponenten sind im Kit enthalten:
Die folgenden Produkte sind nicht im Kit enthalten, werden aber für die Anwendung der Methode benötigt:
Als Kunde können Sie sich für den kompletten Zugang bitte hier anmelden oder neu registrieren.