25-OH-Vitamin D3/D2 im Serum/Plasma (Online-Methode) - HPLC

Bestell-Nr.: 38900/1000, für 1000 Tests
Parameter:
25-OH-Vitamin D2, 25-OH-Vitamin D3

Geringes Probenvolumen: 100 µl
Selektive Online-Probenvorbereitung
Verlässliche Trennung

25-OH-Vitamin D2

25-OH-Vitamin D3

Klinische Relevanz

Vitamin D (Cholecalciferol, Colecalciferol oder kurz Calciol) ist eine anerkannte klinisch-chemische Messgröße im Zusammenhang mit Osteoporose und Osteopenie (Minderung der Knochendichte). Darüber hinaus spielt es eine Rolle bei der Immunantwort, bei kardiovaskulären Erkrankungen und bestimmten Krebsarten. Daher ist die Diagnostik von Vitamin D aus unterschiedlicher Sicht von großer Bedeutung.

25-OH-Vitamin D3 ist der Hauptmetabolit im menschlichen Organismus und direkte Vorstufe der physiologisch aktiven Form 1,25-(OH)2-Vitamin D3. Vitamin-D-Mangel wird in erster Linie durch Nahrungsergänzung mit Vitamin D3 oder Vitamin D2 therapiert. Vitamin D2 ist synthetisch einfacher herzustellen und als Supplement außerhalb der EU und vor allem in den USA verbreitet. Daher ist seine Bestimmung im Serum/Plasma ebenfalls relevant.

 

Produktvorteile

  • Kombinierte Analytik von Vitamin D2 und D3
  • Geringes Probenvolumen von 100 µl ist ausreichend
  • Selektive Online-Probenvorbereitung
  • Bis zu 100 Proben pro Tag

 

Dieser Kit von Chromsystems erlaubt die einfache und schnelle Bestimmung von 25-OH-Vitamin D3 und 25-OH-Vitamin D2 in einem HPLC-Lauf mit UV-Detektion. Der effektiven Proteinfällung ist eine selektive Online-Festphasenextraktion nachgeschaltet, die die Untersuchung von bis zu 100 Proben pro Tag ermöglicht. Die Analytik eignet sich aufgrund des geringen Probenvolumens auch zur Untersuchung von Kinderproben. Die sichere Quantifizierung wird mit einem stabilen internen Standard gewährleistet. Mit niedrigem Zeit- und Kostenaufwand werden so reproduzierbare und zuverlässige Ergebnisse erzielt.

Alternativ gibt es für die HPLC eine Standardmethode (Best.-Nr. 38038) sowie Methoden zur Bestimmung mittels Massenspektrometrie (Best.-Nr. 62000).

 

Inhalt

Mobile Phase A (Online-Methode), 10 x 1000 ml
Mobile Phase B (Online-Methode), 10 x 1000 ml
Internal Standard (Online-Methode), 10 x 25 ml
25-OH-Vitamin D3/D2 Serum Calibration Standard (lyoph.), 2 x 2 ml
25-OH-Vitamin D3/D2 Serum Control, Level I, 2 x 2 ml
25-OH-Vitamin D3/D2 Serum Control, Level II, 2 x 2 ml
HPLC-Säule, 1 Stück
Trap-Säule, 1 Stück
PEEK-encased Vorfilterplättchen, 2 μm, 5 Stück
Reaktionsgefäße, transparent, 100 Stück

Weitere Informationen
Anzahl der Bestimmungen 1000
Bestimmungsgrenzen 5 µg/l
Linearität 5 - 250 µg/l
Wiederfindungsrate 25-OH-Vitamin D3: 99 %; 25-OH-Vitamin D2: 93 %
Intraassay

25-OH-Vitamin D3: Vk ≤ 3,2 %
25-OH-Vitamin D2: Vk ≤ 4,1 %

Interassay

25-OH-Vitamin D3: Vk ≤ 5,6 %

25-OH-Vitamin D2: Vk ≤ 5,7 %

Analysendauer 10 min
Probenvorbereitung
  • 100 µl Serum/Plasma und 250 µl Internal Standard in ein Reaktionsgefäß geben und 20 s mischen (vortex).
  • 10 Minuten auf +4 °C abkühlen.
  • 5 Minuten bei 15000 x g zentrifugieren.
  • 75 µl des Überstandes in das HPLC-System injizieren.
Probenstabilität Bei Raumtemperatur: 3 Tage, bei +2 bis +8 °C: 1 Woche und unter -18 °C: 1 Jahr. Proben lichtgeschützt und gekühlt versenden.
Probenmaterial Serum/Plasma
Injektionsvolumen 75 µl
Flussrate Mobile Phase A (Trap-Säule): 1,0 ml/min; Mobile Phase B (analytische Säule): 0,7 ml/min
Säulentemperatur Raumtemperatur (~25 °C)
Messwellenlänge 265 nm
Information

Für die HPLC-Analytik von 25-OH-Vitamin D3/D2 (Online-Methode) werden zwei HPLC-Pumpen, ein 6-Wegeventil und ein UV-Detektor benötigt.

Hinweis Bitte beachten Sie, dass die frei zugänglichen Informationen dieser Website, insbesondere auch der Probenvorbereitung, nicht zur Verwendung der Produkte ausreichen. Bitte lesen Sie dazu die Anweisungen und Warnhinweise auf Produkten und/oder in der Arbeitsvorschrift.
Method of Analysis HPLC
Parameter 25-OH-Vitamin D2, 25-OH-Vitamin D3
Complete Specification
Linearität: bis 250 µg/l
Bestimmungsgrenze: 5 µg/l
Intra-Assay: 25-OH-Vitamin D3: Vk 3,2 %

25-OH-Vitamin D2: Vk 4,1 %



Inter-Assay: 25-OH-Vitamin D3: Vk 5,6 %

25-OH-Vitamin D2: Vk 5,7 %



Wiederfindungsrate: 25-OH-Vitamin D3: 99 %

25-OH-Vitamin D2: 93 %



Analysendauer: 10 min

HPLC-Parameter:

Für die HPLC-Analytik von 25-OH-Vitamin D3/D2 (Online-Methode) werden zwei HPLC-Pumpen, ein 6-Wegeventil und ein UV-Detektor benötigt.

Injektionsvolumen: 75 µl
Flussraten: Mobile Phase A (Trap-Säule): 1,0 ml/min

Mobile Phase B (analytische Säule): 0,7 ml/min
Messwellenlänge: 265 nm
Säulentemperatur: Raumtemperatur (~25 °C)
  1. 38901 HPLC mobile phase A vitamin D3 vitamin D2 serum plasma
    Mobile Phase A
    Bestell-Nr.: 38901
    25-OH-Vitamin D3/D2 im Serum/Plasma (Online-Methode) - HPLC
    Details
  2. 38902 HPLC mobile phase B vitamin D3 vitamin D2 serum plasma
    Mobile Phase B
    Bestell-Nr.: 38902
    25-OH-Vitamin D3/D2 im Serum/Plasma (Online-Methode) - HPLC
    Details
  3. 38904 HPLC internal standard vitamin D3 vitamin D2 serum plasma
    Internal Standard
    Bestell-Nr.: 38904
    25-OH-Vitamin D3/D2 im Serum/Plasma (Online-Methode) - HPLC
    Details
  4. 38033 HPLC serum calibration standard vitamin D3 vitamin D2
    Vitamin D3/D2 Serum Calibration Standard
    Bestell-Nr.: 38033
    25-OH-Vitamin D3/D2 im Serum/Plasma - HPLC
    Details
  5. 38910 HPLC column vitamin D3 vitamin D2 serum plasma
    HPLC-Säule 25-OH-Vitamin D3/D2 im Serum/Plasma (Online-Methode)
    Bestell-Nr.: 38910
    25-OH-Vitamin D3/D2 im Serum/Plasma (Online-Methode) - HPLC
    Details
  6. 38920 HPLC trap column vitamin D3 vitamin D2 serum plasma
    Trap-Säule
    Bestell-Nr.: 38920
    25-OH-Vitamin D3/D2 im Serum/Plasma (Online-Methode) - HPLC
    Details
  7. PEEK-Vorfiltergehäuse
    PEEK-Vorfiltergehäuse
    Bestell-Nr.: 15010
    Details
  8. Reaktionsgefäße, transparent
    Reaktionsgefäße, transparent
    Bestell-Nr.: 33006
    Transparent
    Details
  1. 38033 HPLC serum calibration standard vitamin D3 vitamin D2
    Vitamin D3/D2 Serum Calibration Standard
    Bestell-Nr.: 38033
    25-OH-Vitamin D3/D2 im Serum/Plasma - HPLC
    Details
  1. 0028 0029 0030 HPLC 25-OH-vitamin D3 25-OH-vitamin D2 serum controls
    25-OH-Vitamin D3/D2 Serum Controls
    Bestell-Nr.: 0028/0029/0030
    Details
  1. PEEK-encased Vorfilterblättchen, 2 µm
    Details
  2. PEEK-Vorfiltergehäuse
    PEEK-Vorfiltergehäuse
    Bestell-Nr.: 15010
    Details
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