Vitamin B1 im Vollblut und Vitamin B6 im Vollblut/Plasma – UHPLC Reagent Kit

Bestell-Nr.: 52952/UHPLC, für 1000 Tests
Parameter:
Vitamin B1 (TPP, Thiaminpyrophosphat), Vitamin B6 (PLP, Pyridoxal-5’-phosphat)

UHPLC-Trennung in 3 min
Spezifischer interner Standard für jeden Parameter
Keine Nachsäulen-Derivatisierung
Eine Probenvorbereitung und ein Lauf für beide Parameter

Assay validiert nach IVDR (=> Konformitätserklärung)

Vitamin B1 (TPP, Thiaminpyrophosphat)

Vitamin B6 (PLP, Pyridoxal-5’-phosphat)

Klinische Relevanz
Vitamin B1 (Thiamin) spielt eine wichtige Rolle bei der Energiegewinnung aus Kohlenhydraten und Fetten. Die aktive Form ist das Thiaminpyrophosphat (TPP), ein Coenzym für einige enzymatische Reaktionen des Kohlenhydratstoffwechsels sowie für die Pyruvat-Decarboxylase. TPP ist außerdem beim oxidativen Glucoseabbau maßgeblich beteiligt. Die Bestimmung der Konzentration von TPP ist aussagekräftiger als Messungen des Gesamtthiamins, da so ausschließlich die physiologisch wirksame Form berücksichtigt wird.

Vitamin B6 umfasst Pyridoxin, Pyridoxamin und Pyridoxal sowie deren Phosphatderivate. Es wird über die Nahrung aufgenommen und über mehrere enzymatische Umwandlungen in die aktive Form Pyridoxal-5‘-Phosphat (PLP) überführt. PLP ist an nahezu hundert enzymatischen Reaktionen beteiligt, unter anderem als Cofaktor beim Aminosäurestoffwechsel sowie bei der Bildung des roten Blutfarbstoffs und von Neurotransmittern im Gehirn.


Produktvorteile
• UHPLC-Trennung in 3 min
• Spezifischer interner Standard für jeden Parameter
• Keine Nachsäulen-Derivatisierung
• Eine Probenvorbereitung und ein Lauf für beide Parameter


Assay-Charakteristika
Dieser UHPLC-Assay ermöglicht die kombinierte Analytik von Vitamin B1 im Vollblut und B6 im Vollblut oder Plasma. Damit erfüllt die Methode dank schnelleren Analysezeiten von weniger als 3 Minuten die Anforderungen für klinische Laboratorien mit höherem Probendurchsatz. Die einfache und effiziente Probenvorbereitung besteht aus einem einzigen Fällungsschritt sowie der anschließenden Derivatisierung im Reaktionsgefäß. Der interne Standard für jeden der beiden Parameter sowie spezielle Qualitätskontrollen gewährleisten eine präzise und sichere Quantifizierung.

Chromsystems bietet alternativ 2 Assays zur Bestimmung mittels HPLC an: eine Standardvariante sowie mit Pre-Mixed Tubes.

Für Laboratorien mit höherem Probendurchsatz gibt es auch eine automatisierte Methode mittels HPLC.


Zwei Kit-Typen verfügbar

Basic Kit
• Nur Probenvorbereitungsreagenzien und Vials enthalten
• Keine überschüssigen Mengen an mobiler Phase und Kalibrator

52052-PREMIX-BK (U)HPLC Basic Kit
Für 200 Probenvorbereitung

52044 Internal Standard, 10 ml (2x)
52005 Precipitation Reagent, 30 ml (2x)
52906 Pre-mixed Neutralisation Tubes, 100 pcs. (2x)
52007 Derivatisation Reagent 1, 2 x 0.3 ml (lyoph.) (2x)
52008 Derivatisation Reagent 2, 15 ml (2x)
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour (light protection), 100 pcs. (2x)

Reagent Kit
• Mobile Phase und Kalibrator enthalten
 

52952/UHPLC Reagent Kit
Für 1000 Tests

52044 Internal Standard, 10 ml (10x)
52005 Precipitation Reagent, 30 ml (10x)
52906 Pre-mixed Neutralisation Tubes, 100 pcs. (10x)
52007 Derivatisation Reagent 1, 2 x 0.3 ml (lyoph.) (10x)
52008 Derivatisation Reagent 2, 15 ml (10x)
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour (light protection), 100 pcs. (10x)
52911 Mobile Phase A (for UHPLC), 1000 ml (2x)
52922 Mobile Phase B (for UHPLC), 1000 ml (1x)
52003 Whole Blood Calibration Standard, 5 x 1.0 ml (lyoph.) (5x)
52210 UHPLC Column, equilibrated, with test chromatogram, 1 pc. (1x)
Weitere Informationen
Analysenmethode UHPLC
Anzahl der Tests 1000
Hinweis Die hier aufgeführten Informationen einschließlich der Probenvorbereitung sind für die Verwendung des Produkts nicht ausreichend. Bitte lesen Sie die Angaben in der Arbeitsvorschrift. Dort befinden sich detaillierte Informationen zu Limitationen, die mit der Verwendung des Produkts gemäß seiner Zweckbestimmung verbunden sind. Detaillierte Daten zur Leistungsbewertung finden Sie im Anhang der Arbeitsvorschrift.
Untere und obere Bestimmungsgrenze

TPP 5,0 – 750 µg/l (Vollblut)
PLP 5,0 – 500 µg/l (Vollblut)
PLP 1,.4 – 500 µg/l (Plasma)

Probenmaterial Vollblut / Plasma
Probenvorbereitung

Die hier aufgeführten Informationen zur Probenvorbereitung sind für die Verwendung im Labor nicht ausreichend. Eine detaillierte Schritt-für-Schritt-Beschreibung finden Sie in der Arbeitsvorschrift.

  • 200 μl Vollblut/Plasma mit 100 μl Internal Standard und 300 μl Precipitation Reagent in einem bersteinfarbenen Reaktionsgefäß zusammengeben.
  • 30 s mischen (Vortex).
  • 5 min bei 14000 x g zentrifugieren.
  • 100 μl Derivatisation Mix in ein beschriftetes Pre-mixed Neutralisation Tube geben und 250 μl des in Schritt 1 bis 3 gewonnnen Überstands zugeben, kurz mischen, den entstehenden Niederschlag nicht abzentrifugieren!
  • 25 min bei 60° C inkubieren (Wasserbad).
  • Mindestens 10 min bei +2 bis +8 °C abkühlen und danach 2 min bei 14000 x g zentrifugieren.
  • Überstand in ein braunes Autosamplergefäß (Lichtschutz) überführen, 5 µl in das UHPLC-System injizieren.
Laufzeit 3 min
Injektionsvolumen 5 μl
Flussrate 0,7 ml/min
Säulentemperatur +20 bis +25 °C
Messwellenlängen

Start mit EX 320 nm, EM 415 nm,
nach ca. 1,6 min auf EX 367 nm, EM 435 nm umschalten

Zus. Info Es ist jedes gängige UHPLC-System mit binärer Pumpe, Injektor und programmierbarem Fluoreszenz-Detektor geeignet.
Parameter Vitamin B1 (TPP, Thiaminpyrophosphat), Vitamin B6 (PLP, Pyridoxal-5’-phosphat)

Vitamin B1 in Whole Blood and Vitamin B6 in Whole Blood / Plasma – UHPLC Reagent Kit (52952/UHPLC)
For 1000 tests

Order No. Reagent Kit components (Quantities in kit)
52911 Mobile Phase A (for UHPLC), 1000 ml (2x)
52922 Mobile Phase B (for UHPLC), 1000 ml (1x)
52003 Whole Blood Calibration Standard, 5 x 1.0 ml (lyoph.) (5x)
52044 Internal Standard, 10 ml (10x)
52005 Precipitation Reagent, 30 ml (10x)
52906 Pre-mixed Neutralisation Tubes, 100 pcs. (10x)
52007 Derivatisation Reagent 1, 2 x 0.3 ml (lyoph.) (10x)
52008 Derivatisation Reagent 2, 15 ml (10x)
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour (light protection), 100 pcs. (10x)
52210 UHPLC Column, equilibrated, with test chromatogram, 1 pc. (1x)

 

Order No. Required components (not included in the Reagent Kit)
  Required for the analysis of vitamin B1 and vitamin B6 in whole blood:
0165 Vitamin B1/B6 Whole Blood Control, Level I, 5 x 2.0 ml (lyoph.)
0167 Vitamin B1/B6 Whole Blood Control, Level II, 5 x 2.0 ml (lyoph.)
   
  Required for the analysis of vitamin B6 in plasma:
36005 Plasma Calibration Standard, 5 x 1.0 ml (lyoph.)
0038 Vitamin B6 Plasma Control, Level I, 5 x 2.0 ml (lyoph.)
0039 Vitamin B6 Plasma Control, Level II, 5 x 2.0 ml (lyoph.)

 

Order No. General lab equipment (non-CE/IVD products)
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour (light protection), 100 pcs.
15060 Prefilter Housing, 1 pc.
15061 Prefilter, 0.5 µm, 5 pcs.
Die folgenden Komponenten sind im Kit enthalten:
Die folgenden Produkte sind nicht im Kit enthalten, werden aber für die Anwendung der Methode benötigt:
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Vitamin B1 (TPP, Thiaminpyrophosphat)

Vitamin B6 (PLP, Pyridoxal-5’-phosphat)

Klinische Relevanz
Vitamin B1 (Thiamin) spielt eine wichtige Rolle bei der Energiegewinnung aus Kohlenhydraten und Fetten. Die aktive Form ist das Thiaminpyrophosphat (TPP), ein Coenzym für einige enzymatische Reaktionen des Kohlenhydratstoffwechsels sowie für die Pyruvat-Decarboxylase. TPP ist außerdem beim oxidativen Glucoseabbau maßgeblich beteiligt. Die Bestimmung der Konzentration von TPP ist aussagekräftiger als Messungen des Gesamtthiamins, da so ausschließlich die physiologisch wirksame Form berücksichtigt wird.

Vitamin B6 umfasst Pyridoxin, Pyridoxamin und Pyridoxal sowie deren Phosphatderivate. Es wird über die Nahrung aufgenommen und über mehrere enzymatische Umwandlungen in die aktive Form Pyridoxal-5‘-Phosphat (PLP) überführt. PLP ist an nahezu hundert enzymatischen Reaktionen beteiligt, unter anderem als Cofaktor beim Aminosäurestoffwechsel sowie bei der Bildung des roten Blutfarbstoffs und von Neurotransmittern im Gehirn.


Produktvorteile
• UHPLC-Trennung in 3 min
• Spezifischer interner Standard für jeden Parameter
• Keine Nachsäulen-Derivatisierung
• Eine Probenvorbereitung und ein Lauf für beide Parameter


Assay-Charakteristika
Dieser UHPLC-Assay ermöglicht die kombinierte Analytik von Vitamin B1 im Vollblut und B6 im Vollblut oder Plasma. Damit erfüllt die Methode dank schnelleren Analysezeiten von weniger als 3 Minuten die Anforderungen für klinische Laboratorien mit höherem Probendurchsatz. Die einfache und effiziente Probenvorbereitung besteht aus einem einzigen Fällungsschritt sowie der anschließenden Derivatisierung im Reaktionsgefäß. Der interne Standard für jeden der beiden Parameter sowie spezielle Qualitätskontrollen gewährleisten eine präzise und sichere Quantifizierung.

Chromsystems bietet alternativ 2 Assays zur Bestimmung mittels HPLC an: eine Standardvariante sowie mit Pre-Mixed Tubes.

Für Laboratorien mit höherem Probendurchsatz gibt es auch eine automatisierte Methode mittels HPLC.


Zwei Kit-Typen verfügbar

Basic Kit
• Nur Probenvorbereitungsreagenzien und Vials enthalten
• Keine überschüssigen Mengen an mobiler Phase und Kalibrator

52052-PREMIX-BK (U)HPLC Basic Kit
Für 200 Probenvorbereitung

52044 Internal Standard, 10 ml (2x)
52005 Precipitation Reagent, 30 ml (2x)
52906 Pre-mixed Neutralisation Tubes, 100 pcs. (2x)
52007 Derivatisation Reagent 1, 2 x 0.3 ml (lyoph.) (2x)
52008 Derivatisation Reagent 2, 15 ml (2x)
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour (light protection), 100 pcs. (2x)

Reagent Kit
• Mobile Phase und Kalibrator enthalten
 

52952/UHPLC Reagent Kit
Für 1000 Tests

52044 Internal Standard, 10 ml (10x)
52005 Precipitation Reagent, 30 ml (10x)
52906 Pre-mixed Neutralisation Tubes, 100 pcs. (10x)
52007 Derivatisation Reagent 1, 2 x 0.3 ml (lyoph.) (10x)
52008 Derivatisation Reagent 2, 15 ml (10x)
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour (light protection), 100 pcs. (10x)
52911 Mobile Phase A (for UHPLC), 1000 ml (2x)
52922 Mobile Phase B (for UHPLC), 1000 ml (1x)
52003 Whole Blood Calibration Standard, 5 x 1.0 ml (lyoph.) (5x)
52210 UHPLC Column, equilibrated, with test chromatogram, 1 pc. (1x)
Weitere Informationen
Analysenmethode UHPLC
Anzahl der Tests 1000
Hinweis Die hier aufgeführten Informationen einschließlich der Probenvorbereitung sind für die Verwendung des Produkts nicht ausreichend. Bitte lesen Sie die Angaben in der Arbeitsvorschrift. Dort befinden sich detaillierte Informationen zu Limitationen, die mit der Verwendung des Produkts gemäß seiner Zweckbestimmung verbunden sind. Detaillierte Daten zur Leistungsbewertung finden Sie im Anhang der Arbeitsvorschrift.
Untere und obere Bestimmungsgrenze

TPP 5,0 – 750 µg/l (Vollblut)
PLP 5,0 – 500 µg/l (Vollblut)
PLP 1,.4 – 500 µg/l (Plasma)

Probenmaterial Vollblut / Plasma
Probenvorbereitung

Die hier aufgeführten Informationen zur Probenvorbereitung sind für die Verwendung im Labor nicht ausreichend. Eine detaillierte Schritt-für-Schritt-Beschreibung finden Sie in der Arbeitsvorschrift.

  • 200 μl Vollblut/Plasma mit 100 μl Internal Standard und 300 μl Precipitation Reagent in einem bersteinfarbenen Reaktionsgefäß zusammengeben.
  • 30 s mischen (Vortex).
  • 5 min bei 14000 x g zentrifugieren.
  • 100 μl Derivatisation Mix in ein beschriftetes Pre-mixed Neutralisation Tube geben und 250 μl des in Schritt 1 bis 3 gewonnnen Überstands zugeben, kurz mischen, den entstehenden Niederschlag nicht abzentrifugieren!
  • 25 min bei 60° C inkubieren (Wasserbad).
  • Mindestens 10 min bei +2 bis +8 °C abkühlen und danach 2 min bei 14000 x g zentrifugieren.
  • Überstand in ein braunes Autosamplergefäß (Lichtschutz) überführen, 5 µl in das UHPLC-System injizieren.
Laufzeit 3 min
Injektionsvolumen 5 μl
Flussrate 0,7 ml/min
Säulentemperatur +20 bis +25 °C
Messwellenlängen

Start mit EX 320 nm, EM 415 nm,
nach ca. 1,6 min auf EX 367 nm, EM 435 nm umschalten

Zus. Info Es ist jedes gängige UHPLC-System mit binärer Pumpe, Injektor und programmierbarem Fluoreszenz-Detektor geeignet.
Parameter Vitamin B1 (TPP, Thiaminpyrophosphat), Vitamin B6 (PLP, Pyridoxal-5’-phosphat)

Vitamin B1 in Whole Blood and Vitamin B6 in Whole Blood / Plasma – UHPLC Reagent Kit (52952/UHPLC)
For 1000 tests

Order No. Reagent Kit components (Quantities in kit)
52911 Mobile Phase A (for UHPLC), 1000 ml (2x)
52922 Mobile Phase B (for UHPLC), 1000 ml (1x)
52003 Whole Blood Calibration Standard, 5 x 1.0 ml (lyoph.) (5x)
52044 Internal Standard, 10 ml (10x)
52005 Precipitation Reagent, 30 ml (10x)
52906 Pre-mixed Neutralisation Tubes, 100 pcs. (10x)
52007 Derivatisation Reagent 1, 2 x 0.3 ml (lyoph.) (10x)
52008 Derivatisation Reagent 2, 15 ml (10x)
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour (light protection), 100 pcs. (10x)
52210 UHPLC Column, equilibrated, with test chromatogram, 1 pc. (1x)

 

Order No. Required components (not included in the Reagent Kit)
  Required for the analysis of vitamin B1 and vitamin B6 in whole blood:
0165 Vitamin B1/B6 Whole Blood Control, Level I, 5 x 2.0 ml (lyoph.)
0167 Vitamin B1/B6 Whole Blood Control, Level II, 5 x 2.0 ml (lyoph.)
   
  Required for the analysis of vitamin B6 in plasma:
36005 Plasma Calibration Standard, 5 x 1.0 ml (lyoph.)
0038 Vitamin B6 Plasma Control, Level I, 5 x 2.0 ml (lyoph.)
0039 Vitamin B6 Plasma Control, Level II, 5 x 2.0 ml (lyoph.)

 

Order No. General lab equipment (non-CE/IVD products)
33005 Reaction Vials, 1.5 ml, amber colour (light protection), 100 pcs.
15060 Prefilter Housing, 1 pc.
15061 Prefilter, 0.5 µm, 5 pcs.
Die folgenden Komponenten sind im Kit enthalten:
Die folgenden Produkte sind nicht im Kit enthalten, werden aber für die Anwendung der Methode benötigt:
Als Kunde können Sie sich für den kompletten Zugang bitte hier anmelden oder neu registrieren.