Upgrade 3-epi-25-OH-Vitamin D3/D2 - LC-MS/MS

Bestell-Nr.: Epimer Upgrade
Parameter:
25-OH-Vitamin D2, 25-OH-Vitamin D3, 3-epi-25-OH-Vitamin D2, 3-epi-25-OH-Vitamin D3

Upgrade zu Best.-Nr. 62000
MassChrom® 25-OH-Vitamin D3/D2 im Serum/Plasma

Artikel für gruppiertes Produkt
Artikelname Menge
Analytische Säule (Epimere) 25-OH-Vitamin D3/D2 im Serum/Plasma - LC-MS/MS
Bestell-Nr.: 62120
Trap-Säule (Epimere)
Bestell-Nr.: 62110/Epi
Internal Standard Epimers-Mix
Bestell-Nr.: 62044
Tuning Mix (Epimers)
Bestell-Nr.: 62016
3PLUS1® Multilevel Serum Calibrator Set (mit beiden Epimerformen)
Bestell-Nr.: 62029
MassCheck® 3-epi-25-OH-D3/D2 and 25-OH- D3/D2 Serum Control, Bi-Level (I + II)
Bestell-Nr.: 0310

25-OH-Vitamin D2

25-OH-Vitamin D3

3-epi-25-OH-Vitamin D2

3-epi-25-OH-Vitamin D3

Klinische Relevanz

Ein erheblicher Teil des 25-OH-Vitamin D3/D2 kann bei Kleinkindern unter einem Jahr in Form des sogenannten C3-Epimers vorliegen. Bei den Epimeren ist lediglich die Hydroxylfunktion in Position 3 des Secosteroidgerüsts in der räumlichen Ausrichtung verändert. Da sich die biologische Aktivität der epimeren Formen von den nicht-epimeren Formen unterscheidet, ist es von erheblicher Bedeutung, die Konzentrationen der verschiedenen 25-OH-Vitamin D-Formen zu unterscheiden. So wird von den epimeren Formen ein deutlich verringerter calcemischer Effekt bei der Knochenmineralisierung vermutet.

 

Produktvorteile

  • Simultane Messung von Vitamin D3, D2 sowie dessen C3-Epimere
  • Isotopenmarkierter interner Standard
  • 3PLUS1® Multilevel Calibrator Set mit Blank-Kalibrator und MassCheck© Kontrollen

 

Dieses Upgrade zur MassChrom® 25-OH-Vitamin D3/D2-Analytik erlaubt die Trennung der Hauptmetabolite der Vitamine D3 und D2, 25-Hydroxycholecalciferol und 25-Hydroxyergocalciferol, in Kombination mit ihren epimeren Formen 3-epi-25-OH-Vitamin D3 und 3-epi-25-OH-Vitamin D2 und ermöglicht so deren separate Quantifizierung mittels LC-MS/MS.

Die manuelle Probenvorbereitung ist auf eine einfache und effektive Proteinfällung beschränkt. Analog zur bestehenden 25-OH-Vitamin D3/D2-Bestimmung werden die Analyte mit Hilfe einer Trap-Säule online angereichert und so störende Matrixbestandteile abgetrennt. Über ein einfaches Schaltventil ist die Trap-Säule mit einer speziellen hochauflösenden analytischen Säule verbunden, die die chromatographische Trennung und die weitere Aufreinigung aller Analyte ermöglicht. Die Methode zeichnet sich durch die Verwendung der APCI-Technik (Atmospheric Pressure Chemical Ionisation) und des an die epimeren Formen angepassten isotopenmarkierten internen Standards aus. Matrixeffekte („Ion Suppression“) sind minimiert und die Präzision und Robustheit der Methode optimiert. Das 3PLUS1® Multilevel Calibrator Set und die MassCheck® Kontrollen enthalten zusätzlich beide Epimerformen von 25-OH-Vitamin D3/D2 und gewährleisten so eine hohe Genauigkeit der Ergebnisse für alle Vitamin-D Epimere.

Weitere Informationen
Analysenmethode LC-MS/MS
Bestimmungsgrenzen (3-epi-)25-OH-Vitamin D2: 1,0 μg/l (3-epi-)25-OH-Vitamin D3: 2,0 μg/l
Linearität

bis zu  250 μg/l

Intraassay VK < 5%
Interassay VK < 6%
Analysendauer 8,5–10 min
Probenmaterial Serum/Plasma
Präanalytik

Patientenproben sind bei Raumtemperatur 3 Tage bei +2 bis +8 °C 1 Woche haltbar. Für eine längere Lagerung (maximal 1 Monat) sollten die Proben tiefgefroren unter  -18 °C aufbewahrt werden.

Probenvorbereitung
  • 100 μl Probe/Kalibrator/MassCheck® Kontrolle in Reaktionsgefäß vorlegen.
  • 25 μl Precipitation Reagent zugeben.
  • 200 μl Internal Standard Mix zugeben, 20 s mischen (Vortex).
  • 10 min bei +4 °C inkubieren.
  • 5 min bei 15000 x g zentrifugieren.
  • 200 μl Überstand in Autosampler-Vial überführen.
Probenstabilität Probenstabilität: bis zu 3 Tage bei Raumtemperatur, bzw. 1 Woche bei +2 bis +8°C, bei längerer Lagerung (bis max. 1 Monat) sollten die Proben unter -18°C eingefroren werden.
Injektionsvolumen 10–50 μl
Säulentemperatur 40 °C
Ionisation APCI positiv
MS/MS-Modus MRM
Hinweis Bitte beachten Sie, dass die frei zugänglichen Informationen dieser Website, insbesondere auch der Probenvorbereitung, nicht zur Verwendung der Produkte ausreichen. Bitte lesen Sie dazu die Anweisungen und Warnhinweise auf Produkten und/oder in der Arbeitsvorschrift.
Parameter 25-OH-Vitamin D2, 25-OH-Vitamin D3, 3-epi-25-OH-Vitamin D2, 3-epi-25-OH-Vitamin D3
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