Vitamin B2 im Vollblut - HPLC

Bestell-Nr.: 37000, für 100 Tests
Parameter:
Flavinadenindinukleotid (FAD), Flavinmononukleotid (FMN), Vitamin B2 (Riboflavin)

Sichere Ergebnisse durch Stabilisierung von FAD
Simultane Bestimmung von FMN
Stabile Kalibratoren und Kontrollen

Flavinadenindinukleotid (FAD), Flavinmononukleotid (FMN)

Vitamin B2 (Riboflavin)

Klinische Relevanz

Vitamin B2 (Riboflavin) gehört zum Vitamin-B-Komplex, einer heterogenen Gruppe wasserlöslicher Vitamine, die alle Vorstufen von Coenzymen sind. Aus Riboflavin werden die Coenzyme Flavinadenindinukleotid (FAD) und Flavinmononukleotid (FMN) gebildet, die als prosthetische Gruppe in Flavinenzymen für die Übertragung von Wasserstoff in der Atmungskette verantwortlich sind. Weiterhin spielen sie eine Rolle beim Stoffwechsel der Kohlenhydrate, Fett- und Aminosäuren. Neben dem Einfluss auf andere Vitamine, wie dem Vitamin B6, ist Riboflavin auch zur Aufrechterhaltung der Glutathionreduktase-Aktivität von entscheidender Bedeutung, wirkt demzufolge indirekt antioxidativ.

In Westeuropa ist ein Mangel an Riboflavin vor allem bei Veganern, Rauchern, Diabetikern und bei übermäßigem Alkoholkonsum zu beobachten. Typische Hinweise auf Vitamin-B2-Mangel sind schlecht heilende Risse an den Mundwinkeln, Entzündungen der Mundschleimhaut und Zunge, Bindehautentzündungen sowie entzündliche Hautveränderungen. Ein starker Vitamin-B2-Mangel begünstigt möglicherweise auch den grauen Star.

 

Produktvorteile

  • Sichere Messergebnisse durch Stabilisierung von FAD
  • Simultane Bestimmung von Riboflavin, FMN und FAD
  • Stabile Kalibratoren und Kontrollen

 

Mit der Methode von Chromsystems können Riboflavin und seine aktiven Metabolite FAD und FMN im Vollblut unter Verwendung eines isokratischen HPLC-Systems schnell, spezifisch und einfach bestimmt werden. Aufgrund ihrer Eigenfluoreszenz können die Analyte direkt und ohne Derivatisierung fluorimetrisch detektiert werden. Die Probenvorbereitung beschränkt sich auf eine effektive Proteinfällung und eine anschließende Stabilisierung der Analyte. Eine spezielle HPLC-Säule und eine optimierte mobile Phase erlauben die sichere und zuverlässige Quantifizierung der Analyten.

Weitere Informationen
Anzahl der Bestimmungen 100
Bestimmungsgrenzen

FAD 3 µg/l
FMN 1 µg/l
Riboflavin 2 µg/l

Linearität

FAD bis 1000 µg/l
FMN bis 500 µg/l
Riboflavin bis 500 µg/l

Wiederfindungsrate FAD 106 %, FMN 100 %, Riboflavin 108 %
Intraassay

VK < 3 %

Interassay

VK < 5,9 %

Analysendauer ca. 9 min
Probenvorbereitung
  • 200 μl Vollblut (bzw. rekonstituierter Kalibrator oder Kontrollen), 200 μl Extraction Buffer und 400 μl Precipitation Reagent in einem bernsteinfarbenen Reaktionsgefäß (Lichtschutz) zusammengeben und sofort 30 s mischen (Vortex).

  • 10 min bei mindestens 9000 x g zentrifugieren.

  • In einem braunen Autosamplergefäß (Lichtschutz) 100 μl Neutralisation Buffer vorlegen, danach 500 μl Überstand zugeben und gut mischen (Vortex).

  • 50 μl der so erhaltenen Mischung in das HPLC-System injizieren.

Probenstabilität Die vorbereiteten Proben sind lichtgeschützt (braune Autosamplergefäße) bei Raumtemperatur 24 h und bei +2 bis +8 °C sieben Tage stabil. Bei längerer Lagerung (max. zwei Wochen) sollten die Proben unter -18 °C aufbewahrt werden.
Probenmaterial Vollblut
Präanalytik

Patientenproben sind lichtgeschützt und in einem geschlossenen Gefäß bei +2 bis +8 °C einen Tag haltbar. Proben, die nicht sofort analysiert werden, müssen unter -18 °C aufbewahrt werden.

Injektionsvolumen 50 µl
Flussrate 1,2 ml/min
Säulentemperatur Raumtemperatur (~ 20 °C)
Messwellenlänge

EX 465 nm

EM 525 nm

Gradient Isokratisch
Hinweis Bitte beachten Sie, dass die frei zugänglichen Informationen dieser Website, insbesondere auch der Probenvorbereitung, nicht zur Verwendung der Produkte ausreichen. Bitte lesen Sie dazu die Anweisungen und Warnhinweise auf Produkten und/oder in der Arbeitsvorschrift.
Method of Analysis HPLC
Parameter Flavinadenindinukleotid (FAD), Flavinmononukleotid (FMN), Vitamin B2 (Riboflavin)
Zusätzliche Informationen Es eignet sich jedes gängige isokratische HPLC-System mit Fluoreszenz-Detektor.

  1. 37011 HPLC mobile phase vitamin B2 whole blood
    Mobile Phase
    Bestell-Nr.: 37011
    Vitamin B2 im Vollblut – HPLC
    Details
  2. 37011 HPLC mobile phase vitamin B2 whole blood
    Mobile Phase, 10 x 1000 ml
    Bestell-Nr.: 37022
    Vitamin B2 im Vollblut – HPLC
    Details
  3. 37005 HPLC extraction buffer vitamin B2 whole blood
    Extraction Buffer
    Bestell-Nr.: 37005
    Vitamin B2 im Vollblut – HPLC
    Details
  4. 37007 HPLC precipitation reagent vitamin B2 whole blood
    Precipitation Reagent
    Bestell-Nr.: 37007
    Vitamin B2 im Vollblut – HPLC
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  5. 37099 HPLC neutralisation buffer vitamin B2 whole blood
    Neutralisation Buffer
    Bestell-Nr.: 37099
    Vitamin B2 im Vollblut – HPLC
    Details
  6. Reaktionsgefäße
    Reaktionsgefäße
    Bestell-Nr.: 33005
    Bernsteinfarben für Lichtschutz
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  7. 37008 HPLC vitamin B1 vitamin B2 whole blood calibration standard
    Whole Blood Calibration Standard Vitamins B1/B2
    Bestell-Nr.: 37008
    Vitamin B1/B2 im Vollblut - HPLC
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  1. 37008 HPLC vitamin B1 vitamin B2 whole blood calibration standard
    Whole Blood Calibration Standard Vitamins B1/B2
    Bestell-Nr.: 37008
    Vitamin B1/B2 im Vollblut - HPLC
    Details
  1. 0033 0034 0035 HPLC vitamin B1 vitamin B2 whole blood controls
    Vitamin B1/B2 Whole Blood Controls
    Bestell-Nr.: 0033/0034/0035
    Details
  1. PEEK-Vorfiltergehäuse
    PEEK-Vorfiltergehäuse
    Bestell-Nr.: 15010
    Details
  2. 37110 HPLC column vitamin B2 whole blood
    HPLC-Säule
    Bestell-Nr.: 37110
    Vitamin B2 im Vollblut – HPLC
    Details
  3. PEEK-encased Vorfilterblättchen, 5 µm
    Details
  4. Vorsäulenkartusche 4/10
    Vorsäulenkartusche 4/10
    Bestell-Nr.: 17037
    Vitamin B2 (FAD, FMN, Riboflavin) im Vollblut – HPLC
    Details
  5. Halter für Vorsäulenkartuschen 4/10
    Details
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