Homocystein im Serum/Plasma - HPLC

Bestell-Nr.: 45000, für 200 Tests
Parameter:
Homocystein

Schnelle Probenvorbereitung
Kurze Analysenzeit
Standzeit der HPLC-Säule für mehr als 2000 Trennungen
Geeignet für alle Blutabnahmesysteme

Homocystein

Klinische Relevanz

Homocystein (Hcy) ist eine nicht-proteinogene Aminosäure, die bei der Demethylierung der Aminosäure Methionin entsteht. Hierbei sind einige Enzyme involviert, die Cofaktoren wie Vitamin B6 und Vitamin B12 benötigen. Bei einem Mangel dieser Cofaktoren kommt es zu einem Anstieg der Hcy-Konzentration, aber auch angeborene genetische Veränderungen können dafür verantwortlich sein.

Bereits moderat erhöhte Hcy-Werte sind ein Risikofaktor für Herz-Kreislauferkrankungen, Arteriosklerose und koronare Herzkrankheiten. Erhöhte Hcy-Werte werden auch bei der Homocystinurie festgestellt, einer angeborenen genetischen Veränderung, bei der Enzyme für die Verstoffwechslung fehlen oder nur in zu geringen Mengen zur Verfügung stehen. Hier haben bereits Neugeborene erhöhte Hcy-Werte, rechtzeitig aufgedeckt ist die Erkrankung jedoch behandelbar. Das Neugeborenenscreening (NBS) auf Homocystinurie ist daher in einigen europäischen Ländern, wie in Irland, Pflicht, in Deutschland nur im Rahmen eines erweiterten NBS und vereinzelt in Verdachtsfällen.

 

Produktvorteile

  • Schnelle Probenvorbereitung
  • Kurze Analysenzeit
  • Mehr als 2000 Trennungen mit einer HPLC-Säule
  • Geeignet für alle Blutabnahmesysteme

 

Mit diesem Kit wird das Gesamthomocystein einfach und zuverlässig im Serum/Plasma bestimmt. Dabei beschränkt sich die Probenvorbereitung auf die Freisetzung des proteingebundenen Homocysteins und einem Fällungsschritt mit anschließender Derivatisierung. Die chromatographische Trennung erfolgt auf einem isokratischen HPLC-System mit Fluoreszenz-Detektion. Unabhängig des Blutabnahmesystems erlauben die aufeinander abgestimmten Reagenzien eine sichere und verlässliche Quantifizierung von Homocystein innerhalb einer kurzen Analysenzeit von weniger als 6 Minuten.

Weitere Informationen
Anzahl der Bestimmungen 200
Bestimmungsgrenzen 0,4 µmol/l
Linearität bis 400 µmol/l
Wiederfindungsrate 96–99 %
Intraassay

VK = 0,9– 2,2 %

Interassay VK = 2,9–3,1 %
Analysendauer 5,5 min
Probenvorbereitung
  • 100 µl Plasma/Serum, 25 µl Internal Standard und 75 µl Reduction Reagent zusammengeben.
  • 2 s auf schütteln (Vortex) und 10 min bei Raumtemperatur inkubieren.
  • 100 µl Precipitation Reagent zugeben.
  • 30 s schütteln (Vortex).
  • 5 bis 7 Minuten bei 9000 x g zentrifugieren.
  • In separatem Reaktionsgefäß 100 µl Derivatisierungslösung vorlegen.
  • 50 µl Überstand der Zentrifugation, gut durchmischen.
  • 10 min bei +50 bis +55 °C inkubieren danach sofort abkühlen.
  • 20 bis 50 µl in das HPLC-System injizieren.
Probenstabilität Die vorbereiteten Proben sind bei Raumtemperatur max. 20 h, bei +2 bis +8 °C 5 Tage und unter -18 °C bis zu 3 Wochen haltbar.
Probenmaterial Serum/Plasma
Präanalytik

Probennahme venös nüchtern. Wenn keine speziellen Homocystein-Blutabnahmesysteme verwendet werden, das Plasma/Serums innerhalb von 45 min nach der Blutabnahme herstellen. Im Plasma bei Raumtemperatur 24 h, bei +4 °C bis zu 7 Tage und unter -18 °C einige Monate haltbar.

Injektionsvolumen 20–50 µl
Flussrate 1,3 bis 1,7 ml/min
Säulentemperatur Raumtemperatur (~ 25 °C)
Messwellenlänge

EX 385 nm
EM 515 nm

Gradient isokratisch
Hinweis Bitte beachten Sie, dass die frei zugänglichen Informationen dieser Website, insbesondere auch der Probenvorbereitung, nicht zur Verwendung der Produkte ausreichen. Bitte lesen Sie dazu die Anweisungen und Warnhinweise auf Produkten und/oder in der Arbeitsvorschrift.
Method of Analysis HPLC
Parameter Homocystein
Complete Specification
Linearität: bis 400 µmol/l
Bestimmungsgrenze: 1,0 µmol/l
Intra-Assay: < 3 %
Inter-Assay: < 4 %
Wiederfindungsrate: 91 %
Analysedauer: 5,5 min

HPLC-Parameter

Für die HPLC-Analytik von Homocystein eignet sich jedes isokratische HPLC-System mit Fluoreszenz-Detektor.

Injektionsvolumen: 25 µl
Flussrate: 1,3 bis 1,7 ml/min
Messwellenlänge: EX 385 nm
EM 515 nm
Säulentemperatur: Raumtemperatur (~25 °C)
Zusätzliche Informationen

Es eignet sich jedes isokratische HPLC-System mit Fluoreszenz-Detektor.

  1. 39001 HPLC mobile phase homocysteine plasma serum
    Mobile Phase
    Bestell-Nr.: 39001
    Homocystein im Serum/Plasma - HPLC
    Details
  2. 39001 HPLC mobile phase homocysteine plasma serum
    Mobile Phase, 10 x 1000 ml
    Bestell-Nr.: 39002
    Homocystein im Serum/Plasma - HPLC
    Details
  3. 39004 HPLC plasma calibration reagent homocysteine
    Homocysteine Plasma Calibration Standard
    Bestell-Nr.: 39004
    Homocystein im Serum/Plasma - HPLC
    Details
  4. 45099 HPLC internal standard homocysteine plasma serum
    Internal Standard
    Bestell-Nr.: 45099
    Homocystein im Serum/Plasma - HPLC
    Details
  5. 45006 HPLC derivatisation reagent 1 homocysteine plasma serum
    Derivatisation Reagent 1
    Bestell-Nr.: 45006
    Homocystein im Serum/Plasma - HPLC
    Details
  6. 45007 HPLC derivatisation reagent 2 homocysteine plasma serum
    Derivatisation Reagent 2
    Bestell-Nr.: 45007
    Homocystein im Serum/Plasma - HPLC
    Details
  7. 45088 HPLC reduction reagent homocysteine plasma serum
    Reduction Reagent
    Bestell-Nr.: 45088
    Homocystein im Serum/Plasma - HPLC
    Details
  8. Reaktionsgefäße
    Reaktionsgefäße
    Bestell-Nr.: 33005
    Bernsteinfarben für Lichtschutz
    Details
  9. 45003 HPLC precipitation reagent homocysteine plasma serum
    Precipitation Reagent
    Bestell-Nr.: 45003
    Homocystein im Serum/Plasma - HPLC
    Details
  1. 39004 HPLC plasma calibration reagent homocysteine
    Homocysteine Plasma Calibration Standard
    Bestell-Nr.: 39004
    Homocystein im Serum/Plasma - HPLC
    Details
  1. 0071 0072 0073 HPLC homocysteine plasma controls
    Homocysteine Plasma Controls
    Bestell-Nr.: 0071/0072/0073
    Details
  1. PEEK-Vorfiltergehäuse
    PEEK-Vorfiltergehäuse
    Bestell-Nr.: 15010
    Details
  2. 39100 HPLC column homocysteine plasma serum
    HPLC-Säule
    Bestell-Nr.: 39100
    Homocystein im Serum/Plasma
    Details
  3. PEEK-encased Vorfilterblättchen, 5 µm
    Details
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