Coenzym Q10 im Serum/Plasma/Vollblut

Coenzym Q10

Klinische Relevanz

Coenzym Q10 (Ubichinon, Q-10 oder UQ) ist strukturell mit Vitamin E verwandt und ist in vielen Organismen Bestandteil der mitochondrialen Atmungskette. Es ist für die zelluläre Energieproduktion essentiell und wirkt darüber hinaus im Körper antioxidativ. Coenzym Q10 wird mit der Nahrung aufgenommen, kann aber auch im menschlichen Körper produziert werden. Aufgrund des hohen Energieumsatzes weisen Herz, Lunge und Leber besonders hohe Q10-Konzentrationen auf. Ein Mangel ist selten, kann aber bei Muskelerkrankungen (Myopathien) auftreten und ist dann therapiebedürftig. Es wird angenommen, dass ein Mangel an Q10 eine Ursache für Herz-Kreislauf-Erkrankungen sein könnte.

Produktvorteile

Keine Flüssig-Flüssig-Extraktion
Kein Eindampfschritt
Stabile Kalibratoren und Kontrollen

Dieser Chromsystems-Kit erlaubt die sichere chromatographische Bestimmung von Coenzym Q10 in einem isokratischen HPLC-Lauf mit UV-Detektion. Coenzym Q10 wird zuerst durch Proteinfällung freigesetzt und anschließend durch eine Festphasenextraktion aufkonzentriert. Eine Extraktion des Plasmas mit neurotoxischem Hexan und das Eindampfen von Überständen wird damit vermieden. Zur sicheren Quantifizierung wird ein stabiler interner Standard verwendet. Die separat erhältlichen Qualitätskontrollen sind humanmatrix-basierend und nach strengen Anforderungen hergestellt.

Technische Daten

Weitere Informationen
Anzahl der Bestimmungen	100
Bestimmungsgrenzen	20 µg/l
Linearität	bis 25 000 µg/l
Wiederfindungsrate	80 %
Intraassay	VK ≤ 4,8 %
Interassay	VK ≤ 5,8 %
Analysendauer	14 min
Probenvorbereitung	Plasma/Serum 500 µl Plasma/Serum und 250 µl Internal Standard im lichtgeschützten Reaktionsgefäß kurz mischen. 500 µl Precipitation Reagent 1 zugeben und 30 sec mischen (Vortex). 10 min bei +2 bis +8 °C inkubieren. 5 min bei 15000 x g zentrifugieren. 100 µl Precipitation Reagent 2 zugeben und 30 sec mischen (Vortex). Sofort 10 min bei 15000 x g zentrifugieren. Den bei der Fällung erhaltenen Überstand vollständig auf die beschriftete Probenvorbereitungssäule geben und zügig durchzentrifugieren (2 min bei 700 x g) oder durchsaugen, Durchlauf verwerfen. 500 µl Wash Buffer 1 durch die Säule zentrifugieren (1 min bei 700 x g) oder durchsaugen, Durchlauf verwerfen. 160 µl Wash Buffer 2 durch die Säule zentrifugieren (2 min bei 700 x g) oder durchsaugen, Durchlauf verwerfen. 250 µl Elution Buffer durch die Probenvorbereitungssäule in ein beschriftetes, lichtgeschütztes Auffanggefäß (z. B. Autosampler-Vial) zentrifugieren (2 min bei 700 x g) oder durchsaugen. 50 µl Eluat in das HPLC-System injizieren. Vollblut 250 µl kaltes HPLC-Wasser im lichtgeschützten Reaktionsgefäß vorlegen, 250 µl Vollblut zugeben und kurz mischen. Zur vollständigen Überführung des Vollbluts die Pipettenspitze mehrmals nachspülen. 250 µl Internal Standard zugeben und kurz mischen. 500 µl Precipitation Reagent 1 zugeben und 30 sec mischen (Vortex). 10 min bei +2 bis +8 °C inkubieren. 5 min bei 15000 x g zentrifugieren. 100 µl Precipitation Reagent 2 zugeben und 30 sec mischen (Vortex). Sofort 10 min bei 15000 x g zentrifugieren. Den bei der Fällung erhaltenen Überstand vollständig auf die beschriftete Probenvorbereitungssäule geben und zügig durchzentrifugieren (2 min bei 700 x g) oder durchsaugen, Durchlauf verwerfen. 500 µl Wash Buffer 1 durch die Säule zentrifugieren (1 min bei 700 x g) oder durchsaugen, Durchlauf verwerfen. 160 µl Wash Buffer 2 durch die Säule zentrifugieren (2 min bei 700 x g) oder durchsaugen, Durchlauf verwerfen. 250 µl Elution Buffer durch die Probenvorbereitungssäule in ein beschriftetes, lichtgeschütztes Auffanggefäß (z. B. Autosampler-Vial) zentrifugieren (2 min bei 700 x g) oder durchsaugen. 50 µl Eluat in das HPLC-System injizieren.
Probenstabilität	Die vorbereiteten Proben sind bei Raumtemperatur bis zu 24 h haltbar.
Probenmaterial	Plasma/Serum/Vollblut
Präanalytik	Patientenproben gekühlt versenden. Wiederholtes Auftauen und wieder Einfrieren vermeiden. Genauere Informationen zur Gewinnung und Haltbarkeit von Patientenproben entnehmen Sie bitte der speziellen Literatur.
Injektionsvolumen	50 µl
Flussrate	2,5 ml/min
Säulentemperatur	Raumtemperatur (~ 25 °C)
Messwellenlänge	275 nm
Gradient	isokratisch
Hinweis	Bitte beachten Sie, dass die frei zugänglichen Informationen dieser Website, insbesondere auch der Probenvorbereitung, nicht zur Verwendung der Produkte ausreichen. Bitte lesen Sie dazu die Anweisungen und Warnhinweise auf Produkten und/oder in der Arbeitsvorschrift.
Method of Analysis	HPLC
Parameter	Coenzym Q10
Zusätzliche Informationen	Es eignet sich jedes isokratische HPLC-System mit UV-Detektor.

Komponenten

Mobile Phase
Bestell-Nr.: 68001

Coenzym Q10 im Plasma/Serum/Vollblut - HPLC

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Mobile Phase, 10 x 1000 ml
Bestell-Nr.: 68002

Coenzym Q10 im Plasma/Serum/Vollblut - HPLC

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Coenzyme Q10 Plasma Calibration Standard
Bestell-Nr.: 68003

Coenzym Q10 im Plasma/Serum/Vollblut - HPLC

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Internal Standard
Bestell-Nr.: 68004

Coenzym Q10 im Plasma/Serum/Vollblut - HPLC

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Precipitation Reagent 1
Bestell-Nr.: 68005

Coenzym Q10 im Plasma/Serum/Vollblut - HPLC

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Precipitation Reagent 2
Bestell-Nr.: 68006

Coenzym Q10 im Plasma/Serum/Vollblut - HPLC

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Wash Buffer 1
Bestell-Nr.: 68007

Coenzym Q10 im Plasma/Serum/Vollblut - HPLC

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Sample Clean Up Columns
Bestell-Nr.: 68008

Coenzym Q10 im Plasma/Serum/Vollblut - HPLC

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Wash Buffer 2
Bestell-Nr.: 68009

Coenzym Q10 im Plasma/Serum/Vollblut - HPLC

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Elution Buffer
Bestell-Nr.: 68010

Coenzym Q10 (Ubichinon) im Plasma/Serum/Vollblut - HPLC

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Reaktionsgefäße
Bestell-Nr.: 33005

Bernsteinfarben für Lichtschutz

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